基质辅助激光解吸电离_飞行时间质谱法检测罕见单糖合成酶_周大炜.pdfVIP

4 1 (FENXI HUAXUE) 1 第 卷 分析化学 研究简报 第 期 2013 1 Chinese Journal of Analytical Chemistry 115 ～ 118 年 月 DOI :10． 3724 / SP． J． 1096． 2013 ． 20427 基质辅助激光解吸电离- 飞行时间质谱法检测罕见单糖合成酶 周大炜* 1 ，2 ，3 刘斌1 ，2 ，3 吴俊丽1 ，2 ，3 齐源远1 1 ( ， 300457) 南开大学泰达生物技术学院 天津 2 ( ， 300457) 天津市微生物功能基因组学重点实验室 天津 3 ( ， 300457) 南开大学分子微生物学与技术教育部重点实验室 天津 VioF ( O30 O ) ， 摘 要 以 普罗威登斯菌 中 抗原基因簇内 编码的甲酰基转移酶酶促反应产物为研究对象 (CID) - (MALDI-TOF MS) 采用碰撞诱导解离 负离子模式基质辅助激光解吸电离 飞行时间质谱 技术建立简 单、 。 0 ． 3 L 、 高效的罕见单糖合成酶监测方法 本方法首先直接质谱分析 未经色谱分离 除盐处理的酶促反应 ， CID ， 。 : 混合物 随后应用 串联质谱技术对酶活反应产物进行结构表征 实现酶活反应的快速监测 结果表明 CID MALDI-TOF / TOF-MS ， ， 高能 平台适用于新建克隆的单糖合成酶酶活反应的监测 与现有的监测方法相比 、 、 、 。 在速度 灵敏度 重现性 自动化和溶剂消耗方面具有绝对优势 ; ; - 关键词 罕见单糖 单糖合成酶 基质辅助激光解吸离子化 飞行时间质谱 1 引 言 ， ， 随着越来越多的细菌表面多糖抗原的结构得到鉴定 被发现的罕见单糖成分逐渐增多 表明罕见 O 。 L- ， 单糖在 抗原多样性的形成中占有非常重要的地位 如 鼠李糖对于某些细菌的毒性是必须的 该合 。 ， 成路径并未在人类中发现 由于含有罕见单糖的抗原结构更容易逃避宿主细胞的免疫识别 因此在细 ， 。 O 菌尤其是致病