人脂联素基因在昆虫杆状病毒系统中的克隆与表达.pdf

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pFastBac—ADPN。 态缨骢,筛选可能含有嬲性克隆的白色蓥落进行鏊定,提取阳性毙墅中的重组 Bacmid,命名为Bacmid--hDPN。 Western 增并感染Sf9细胞,收获的细胞裂解液及细胞培养上清经SDS—PAGE、 blot签定蒺孛静表达产纺。 4.通道改变M。0.I和表达时间摸索最佳表达条件,进行重组蛋囱的表达。 实验结果: 1.成功掏建熏组转移载体,ADPN目的錾因插入位置正确。2。爨组穿梭载体 豢,表鹗ADPN基戮已经成凌重组到抒凝病毒基霆缀中。3.在缨戆壤券上瀵孛捡 测到表达产物,袭明重组凝白利用自身信号肽获得分泌性表达。细胞裂解液和 绥|l篷培养上清串表达静重缝蛋鑫分子量兹楚30kD,其有入瓣联素抗纛毪。 实验缡论: 上述结采表明成功鞫建了表达入脂联索的重缀秆获瘸毒载俸并在昆囊缁臆 中得到可港性分泌性表达。昆虫杼状病毒袭达系统是一个赢效、快速表达重组 脂联素蛋囱的良好选择。 关键词:人脂联綮{糖尿病;真核表达;杆状病毒;昆虫细胞;熏组蛋白 Ⅱ Abstract Inrecent isan in that years,itimportantbreakthroughendocrin0109y has tissueitselfserves tissueendocrinefunction。The adipose adipose asthesiteof andfree acidreleasein triglyceridestorage fatty to tissuealso participates responsechangingenergydemands。Adipose inthe of homeostasisasall endocrine regulationenergy important organ thatsecretesanumberof active suchasleptin, biologicallyadipokines on. so TNF~a,IL喝,adiponectin(ADPN),and isonesuch thathas Adiponectin physiological adipokinesignificant functions。 can metabolismand Adiponectinimproveglucose hasbeen tohave resistance.Adiponectinreported lipometabolism,insulin directantiatherosclerotic wasdemonstratedto effects

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