工厂化养殖杂色鲍致病菌副溶血弧菌的分离鉴定及其生理特性.pdfVIP

维普资讯 工厂化养殖杂色鲍致病菌副溶血弧菌的分离鉴定及其生理特性 邓先余 2，王智学2孙成波3， 陈晓艳4，何建国2 (1．湖南科技大学 生命科学学院，湖南 湘潭 411201；2．中山大学 生命科学学院，广东 广州 510275；3．广 东海洋大学 水产学院，广东 湛江 524025：4．暨南大学 生物工程学系，广东 广州 510632) 摘要：从广东汕尾地区工厂化养殖的患病和死亡的杂 ~(Haliotisdiversicolor)TL养殖海水 中分离到 3株优势菌， 经回归感染试验，证实所分离的细菌为杂色鲍的致病菌。经形态、 生理、生化等多项指标鉴定，该菌株为副溶血弧菌(6r a删0 icus)，并经ATB微生 物 自动鉴定系统证实鉴定结果。在中国大陆，由副溶血弧菌使杂色鲍致病并大量死亡的事件， 本文属首次报道。 关键词：杂色鲍(舶麻 ； 病原菌 副溶血弧菌(14brioparahaemo~cus) 中图分类号：$943 文献标识码：A 文章编号：1000—3096(2007)11．0033．06 杂色鲍 (Haliotisdiversicolor)是中国南方热带和 1．2菌株 亚热带暖水性养殖的主要鲍鱼品种。广东沿海地区自 菌株 ZSU008，ZSU009，ZSU010分别从患病杂 1993年开始工厂化人工养殖，发展十分迅速，到 1999 色鲍、死亡杂色鲍和未过滤的养殖海水中分离。 年产量超过 1600t『1】。然而随着养殖规模的不断扩 1．3 细菌鉴定系统 大，养殖环境 日益恶化，各种病害频繁发生，越来越 革兰氏阴性杆菌鉴定条ID32GN和ATB微生物 成为制约养殖发展的主要因素。引发鲍病的病原主要 自动 鉴定系统 ，均为法 国生物 ．梅里埃 公司 有细菌、病毒、寄生虫和立克次氏体等l2，引。在各类 fbioM6rieux)公司产品。 鲍病害中，细菌性疾病是最常见和最主要的疾病之 1．4杂色鲍体 内病原菌及海水中病原菌的分离 一 ， 具有暴发快、流行广、死亡率高等特点，给中国 取不同来源的患病和死亡的杂色鲍，用 70％酒 鲍养殖业造成重大损失。而细菌病中又以弧菌病为 精消毒体表，以无菌操作取病鲍和死鲍的肝、腮、消 主，目前已报道的可引起鲍发生病害的弧菌主要有河流 化道、腹足、外套膜等组织，无菌剪刀将组织剪碎后 弧菌(Vibriofluvialis)【、溶藻弧菌(alginolyticus) 、 用无菌匀浆器匀浆，在2216E培养基平板上划线接种； 副溶血弧菌 ( parahaemolyticus)[5-71、刨伤弧菌 海水中病原菌的分离：用灭菌 50mL塑料离心管取 (V．vulnifi~us)【引、鲨鱼弧菌(Ecarchariae)[】和亮弧菌 40mL未过滤海水，室温下用离心机(SorvallSuper (V．splendidus)【m】等。然而，国内大多数病害研究主要 T21，USA)8000rm／in离心5min，弃上清，加无菌 集中在北方的养殖品种——皱纹盘鲍，有关杂色鲍的 海水 500a／L悬浮沉淀，用接种环在2216E培养基平 病害研究的报道较为少见。因此，有必要对杂色鲍的 板上划线接种。将划线平板置于28℃下培养 18～24 病原生物学进行深入细致的基础研究。近年来，作者 h，挑取形态一致的优势菌落，进一步划线纯化，经 在广东省进行了杂色鲍的流行病调查，从工厂化养殖 的患病和死亡的杂色鲍及养殖海水中分离到 3株优 收稿 日期：2005．11-03；修回 日期：2006-04．10 势菌，经生理生化鉴定，以标准菌株为参考，鉴定为 基金项 目：广东省科技厅专项