第六章 细菌的遗传分析.pptVIP

第 七 章 细 菌 的 遗 传 分 析 第 一 节细 菌 的 细 胞 和 染 色 体 一 、 细 菌 细 胞 拟 核 , 体 型 小 , 世 代 短 , 分 裂 快 , 分 布 广 二 、 细 菌 染 色 体 双 链 、 环 状DNA 分 子 , 裸 露第 二 节 大 肠 杆 菌 的 突 变 型 筛 选 一 、 大 肠 杆 菌 的 突 变 类 型 一 合 成 代 谢 功 能 的 突 变 型 (anabolic functional mutants ) 二 分 解 代 谢 功 能 的 突 变 型 (catabolic functional mutants ) 三 抗 性 突 变 型 (resistant mutants )二 、 突 变 型 筛 选 对 于 不 同 的 突 变 型 具 有 相 应 的 筛 选 手 段第 三 节 大 肠 杆 菌 的 性 别 一 、 大 肠 杆 菌 性 别 的 发 现 含 链 霉 素 的 培 养 基 : s + r - Astr met ×B str met → 原 养 型 菌 落 r - s + Astr met ×B str met → 无 原 养 型 菌 落 说 明 : A 为 雄 性 , 是 供 体donor B 为 雌 性 , 是 受 体receptor 遗 传 物 质 单 向 转 移二 、F 因 子 与 高 频 重 组 F 因 子F factor 或 F element :又 称 为 性 因 子sex factor 或 致 育 因 子 fertility factor , 封 闭 环 状DNA 分 子 , 分 6 4 子 量 约3.5 ×10 , 长6 × 10 bp, 为 大 肠 杆 菌 染 色 体 全 长 的2%.F 因子的结构包含3个区域:原点??转移的起点致育基因?? 与细菌的接合有关配对区??与染色体上同源序列配对 环状F 因子的模式图三 、 细 菌 重 组 的 特 点只 有 偶 数 次 交 换 才 能 产 生 平 衡 的 重 组 子不 出 现 相 反 的 重 组 子 , 所 以 在 选 择 培 养 基 上 只 出 现 一 种 重 组 子第 四 节 中 断 杂 交 与 重 组 作 图 一 、 中 断 杂 交 实 验 原 理 把 接 合 中 的 细 菌 在 不 同 时 间 取 样 , 并 把 样 品 猛 烈 搅 拌 以 中 断 接 合 中 的 细 菌 , 然 后 分 析 受 体 细 菌 的 基 因 型 。基 本 步 骤 :接 合中 断 杂 交杀 死Hfr -检 查F 细 菌 所 含 基 因作 图二、中 断 杂 交 作 图 根据供体 基因进入 受体细胞 的顺序和 时间绘制 连锁图。三. 重 组 作 图中 断 杂 交 作 图 是 根 据 基 因 转 移 的 先 后 次 序, 以 时 间 为 单 位 进 行 定 位 的, 而 重 组 作 图 是 根 据 基 因 间 重 组 率 进 行 定 位 的 基 因 距 离 较 远 用 中 断 杂 交 作 图 是 有 效 的; 基 因 距 离 较 近, 基 因 间 转 移 时 间 在2 分 钟 之 内, 用 重 组 作 图? 第 五 节 F 因 子 与 性 导1 F 因 子 是F 因 子 携 带 一 段 相 邻 的 细 菌 染 色 体二. 性 导sexduction 或 F -duction利 用 F 因 子 将 供 体 细 胞 的 基 因 导 入 受 体 形 成 部 分 二 倍 体 的 过 程 叫 性 导 性 导 在 遗 传 分 析 中 的 意 义第 六 节 转 化 与 转 导 作 图 一.细菌的转化与作图 转化频率低的原因 1. 受体细胞表面受体部位有限; 2. 外源DNA 进入除受体部位外还必须有酶或蛋白质分子 以及能量等的协同作用 转化过程 1. 双链DNA 分子和细胞表面受体部位进行可逆性结合; 2. 供体DNA 片段被吸入受体细胞; 3. 双链DNA 转变为单链DNA; 4 插入受体细胞的DNA 链中; 5. 形成一个受体亲代类型的DNA 和一个杂种双链DNA二 、 转 导 与 作 图 转导就是以病毒作为载体把遗传信息从一个细菌细 胞传到另一个细菌细胞 普遍性转导与作图 宿主DNA 随机地被携带在病毒中而导致的转导即~ 。? 两 个 基 因 同 时 转 导 的 现 象 称 为 共 转 导 或 并 发 转 导 (co-tranduction ) 。双 因 子 转 导 (two-factor transdution ) : 每 次 观 察 两 个 基 因 , 通 过 两 个 基 因 之 间 的 共 转 导 频 率 确 定 其 在 染 色 体 上 的 排 列 顺 序 。同时观察三因子转导(three-factor