不同饲养条件下内蒙古绒山羊瘤胃甲烷菌组成的研究.pdfVIP

O C T ^ A6RICULTURAE 华北农学报 ·2010，25(5)：228．233 BOREOLI-SlHICa 不同饲养条件下内蒙古绒 山羊瘤 胃甲烷菌 组成 的研究 李长青 ，金 海 ，栗原光规 (1．内蒙古农牧业科学院 生物技术研究 中心 ，内蒙古 呼和浩特 010031；2．日本 国家农业生物资源 研究所 动物科 学研究组 ，日本 茨城 305—0901) 摘要 ：为了解天然放牧和舍饲条件下内蒙古绒 山羊瘤 胃中甲烷菌的种群组成 。选取 甲烷菌 mcrA基因的特异性 引物序列 ，利用 PCR技术对从瘤 胃液 中抽提的细菌总 DNA进行扩增 ，并建立 了甲烷菌特异性 的mcrA基 因文库。用 限制性内切酶 TaqI对该文库特异性片段进行了限制性酶切片断长度 多态性分析 (Restrictionfragmentlengthpolymor— phism，RFLP)。放牧和舍饲 内蒙古绒山羊瘤 胃中甲烷菌的mcrA基因片段被分成 6个不同的RFLP类型，并由此建立 了DNA指纹图谱 ；系统发育树分析表 明，其属于 甲烷杆菌 目和 甲烷微菌 目，且绒山羊瘤 胃中的 甲烷菌大部分属于 甲 烷短杆菌。放牧绒山羊瘤 胃内甲烷菌种类 比舍饲绒山羊更加丰富，6种 甲烷菌所 占比例均较高，而舍饲绒 山羊只有两 种优势菌 比例较高，其他几种所 占比例极低 。 关键词 ：甲烷菌 ；mcrA基 因；瘤 胃液 ；绒 山羊 中图分类号 ：$827 文献标识码 ：A 文章编号：1000—7091(2010)05—0228—06 StudiesonM ethanogeasComposition ofInnerM ongolia CasmereGoatRumen inDifferentFeedingCondition LIChang—qing ，JIN Hai，MitsunoriKURIHARA (1．BiotechnologyResearchCenter，InnerMongoliaAcademyofAgriculturalandAnimalHusbandryScience， Huhhot 010031，China；2．DivisionofAnimalSciences，NationalInstituteofAgrobiologicalSciences， Ibaraki 305—0901，Japan) Abstract：Inordertoanalyzethemethanogen speciescomposition intherumenfrom grazingandbarnfeeding cashmeregoatrespectively．A pairofmcd genespecificprimerswasdesigned，andtotalmicrobialgenomicDNAofru- menliquidwasextractedbythedirectmethodofPCR—amplificationtemplate．ThenamcrA genespecificDNA clone librarywassubsequentlyconstructed．AndRFLPanalysisofmcrAgenewasconductedusingenzymes(TaqI)todigest mcrA generfom thelibrary．Therandomlyselectedclonedrfagmentswerefinallyclusteredinto6differentphylotypes， andcontructtheDNA fingerprintpatternsfrom it．Throughthephylogenetictreesanalyzing，Methanogen incashmere goat／qlmenbelongtomethanobacterialesandmethanomicrobiales，andthepreponderantmetha