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生 物 工 程 学 报 Chin J Biotech 2008, February 25; 24(2): 183-187
journals.im.ac.cn Chinese Journal of Biotechnology ISSN 1000-3061
cjb@im.ac.cn © 2008 Institute of Microbiology, CAS CSM, All rights reserved
研究报告
IL-2
1,2 1 1 1 1 1
齐 静 , 陈吉刚 , 王金勇 , 方 杰 , 吴佳俊 , 周继勇
1 , 310029
2 , 250100
: 将去除信号肽编码序列的鹅 IL-2 基因克隆到原核表达载体 pET-28a (+), 构建了重组表达质粒 pET-28a
(+)-goIL-2, 转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞, 经IPTG 诱导, 实现了重组鹅IL-2(rgoIL-2)蛋白在大肠杆菌中的表达。
SDS和Western-blotting 分析显示, 表达蛋白的分子量约为 15.0 kD, 能被抗鹅IL-2 单克隆抗体特异识别。可溶性
分析表明表达蛋白大部分以包涵体形式存在, 部分以可溶形式存在, 非变性电泳可见可溶性蛋白存在单体和多聚体组
分。镍柱亲和层析法纯化的rgoIL-2 蛋白过滤后, 利用ÄKTA FPLC(快速蛋白分离纯化系统)进行逐级分离, 非变性电泳
可见单一的鹅IL-2 可溶性蛋白单体。体外生物学活性分析显示鹅IL-2 可溶性蛋白单体能刺激鹅淋巴细胞增殖。这为进
一步研究鹅IL-2 的生物学功能及其临床应用奠定基础。
: 鹅 IL-2, 原核表达, 纯化, 单体
Expression of Goose Interleukin-2 gene in Escherichia coli and
Isolation of Its Soluble Monomer
1,2 1 1 1 1 1
Jing Qi , Jigang Chen , Jinyong Wang , Jie Fang , Jiajun Wu , and Jiyong Zhou
1 Laboratory of Virology and Immunology , Institute of Preventive Veterinary Medicine, Zhejiang University, Hangzhou 310029, China
2 Institute of Animal and Veterinary Medicine, Shandong Academy of Agricultural Sciences, Jinan 250100, China
Abstract: Recombinant expression plasmid of pET-28a (+)-goIL-2 was constructed by inserting the goose IL-2 gene without th
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