草莓镶脉病毒（SVBV）ORF Ⅵ基因的克隆及蛋白特性分析.pdfVIP

第12期 李 瑞，等：草莓镶脉病毒(SVBV)ORFVI基因的克隆及蛋白特性分析 5 2o ∞ ∞ 8o oo 2o l嘶 ∞ t∞ 2oo22o2椭 28o3。032o3喵D38o38o螂 啦8 蝴 鹋O6oo A 尊 T C A·a一螺旋 ；B·B一片层 ；T·转角区 ；C．卷衄区． 图5 DNAStar蛋白软件和方法预测 SVBVP6蛋 白二级结构 虽然 SVBVORFVI基因、CaMVORFVI基因和 CERVORFVI基因聚成 1个分支，但 SVBVORF VI基 因与 CaMVORFVI基因和 CERVORFVI基因的序列相似性均较低 ，仅为 26．1 ～27．6 ，这说 明花椰菜花叶病毒属不同成员虽然具有相似的基因组结构和复制机制，但同属不同病毒成员之间基因组变 异极大 ，这可能与病毒在进化过程中对各 自寄主的适应性有关．而同一病毒成员，如 2个分别来 自中国和 美国的SVBV分离物，即使存在着地理隔离，其基因组变异仍然相对较小．花椰菜花叶病毒属不同病毒成 员各个对应的ORF核苷酸序列差异巨大，还可能导致 同一 ORF编码蛋白的功能有所变化． 蛋白质的磷酸化是在蛋白激酶催化下完成的，其逆过程就是脱磷酸化．蛋 白质的磷酸化与脱磷酸化过 程是一种常见的调控手段，在植物体内普遍存在，包括细胞增殖、分化及生物体防御反应，并在细胞信号 传导过程 中发挥重要作用 引．磷酸化修饰可以使受烟草花叶病毒(TMV)侵染的烟草产生系统抗性，这种 抗性是利用细胞分裂素活化蛋 白激酶(MAP)激活水杨酸介导的信号通路实现的u ．由于 SVBVP6蛋白中 含有丰富的蛋 白酶磷酸化位点，推测该蛋白可能与TMV有相似的侵染作用．SVBVP6蛋 白可能通过调节 植物细胞的激酶磷酸化途径，从而影响植物细胞信号转导网络，最终导致受侵染植物产生系统性的防御反 应 ，使植物出现病变症状． SVBVP6蛋 白N端是 1个 a一螺旋富集区，这个结构与同属 CaMVORFVI编码的P6蛋白的N端结 构相似．CaMVP6蛋白通过 a一螺旋富集区的相互作用，可以形成亮氨酸拉链结构域，这种结构域可以在 P6蛋 白富集和细胞核及细胞质定位时发挥作用u ．CaMVP6蛋 白还可以与运动蛋 白相互作用，帮助病毒 在植物体 内传播 ，由此推测 SVBVP6蛋 白可能与病毒在植物细胞质中的富集及传播有关． 参考文献： [1] VAgKOVADH，SPAKJ，PETRZIKK．VariabilityinSequenceofStrawberryVeinBandingVirus口]．BiologiaPlan— tarum，2006，50(4)：660— 666． [2] MORRISTJ，MULLINRH，SCHLEGELDE，eta1．IsolationofaCaulimovirusfromStrawberryTissueInfected withStrawberryVeinBandingVirusEJ]．Phytopathology，1980，70(2)：156—160． E33 肖 敏，张志宏，代红艳，等．PCR检测草莓镶脉病毒的稳定性研究 I-J]．果树学报，2005，22(5)：483--487． [4] 隋 春，吴禄平，张志宏．利用 PCR技术检测草莓镶脉病毒 EJI．园艺学报，2003，30(1)：82--84． [5] PATTANAIKS，DEYN，BHATTACHARYYA S，eta1．IsolationofFull—LengthTranscriptPromoterfrom the StrawberryVeinBandingVirus(SVBV)andExpressionAnalysisbyProtoplastsTransientAssaysand inTransgenie Plants[J]．PlantScience，2004，167(3)：427—438． [6] PAPPU HR，DRUFFELKL．UseofConservedGenomicRegionsandDegeneratePrimersinaPCR—BasedAssayfor theDetectionofMembersoftheGenusCaulimovirusU-1．JournalofVirologicalMethods，2009