果梅ssr 反应系统的优化.pdfVIP

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2017-09-14 发布于山东
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南京农业大学学报　2002 , 25 (4) : 19～22 　 Journal of Nanjing Agricultural University 果梅 SSR 反应体系的优化 1 ,2 2 1 2 高志红 , 章镇 , 韩振海 , 沈志军 ( 1 中国农业大学园艺植物研究所 , 北京 100094 ; 2 南京农业大学园艺学院 , 江苏南京 210095) 摘要 : 以果梅品种小叶猪肝为试材, 研究了果梅 SSR 技术中 PCR 反应体系的主要成分对 SSR 扩增结果的影响 , 并比较了 2 + 采用聚丙稀酰胺凝胶及琼脂糖电泳检测扩增产物多态性的差异。结果表明 : 在 PCR 反应体系中 , Mg 的最适浓度范围为 - 1 - 1 - 1 189～283 mmol ·L ; dNTP 最适浓度为 024 mmol ·L ; 引物的最适浓度为038 μ ; 聚合酶在 265 μ mol ·L Taq L 反应体系中宜加入 1U 。利用此反应体系 , 对 24 个果梅代表品种进行了 SSR 反应 , 用 8 %的非变性聚丙稀酰胺凝胶电泳检测 , 扩增产物在100～200 bp 之间 , 不同品种间DNA 谱带多态性丰富。琼脂糖电泳检测的 DNA 多态性不如聚丙稀酰胺凝胶丰富。关键词 : 果梅 ; 简单重复序列 ; 反应体系 ; 优化中图分类号: S66201 　　　文献标识码 : A 　　　文章编号 : 1000 2030 (2002) 04 0019 04 Optimization on SSR analysis system of Japanese apricot ( Prunus mume Sieb. et Zucc. ) GAO Zhihong1 ,2 , ZHANG Zhen2 , HAN Zhenhai 1 , SHEN Zhijun2 ( 1. Institute for Horticultural Plant , China Agric Univ , Beijing 100094 , China ; 2. College of Horticulture , Nanjing Agric Univ , Nanjing 210095 , China) Abstract : The factors which affected on the SSR results of Japanese apricot and compar