青枯雷尔氏菌种下分化及其病害检测分子探针的研究与应用.pptVIP

青枯雷尔氏菌种下分化及其病害检测分子探针的研究与应用 报告人：车建美 参加人员：刘波博士、蓝江林博士、朱育菁博士、林抗美研究员、车建美硕士、郑雪芳硕士、肖荣凤硕士、周先治博士生、葛慈斌博士生、林营志博士、苏明星硕士生、史怀硕士。 福建省农业科学研究院农业生物资源研究所 二00八年二月七日 2、青枯雷尔氏菌的基因测序 3、青枯雷尔氏菌ITS序列多态性 4、青枯雷尔氏属各小种的亲缘关系 2、青枯雷尔氏菌RAMS多态性分析 3、青枯雷尔氏菌的聚类分析 * * 汇报内容 项目简介 学术思想及研究基础 研究进展（2007年度） 青枯雷尔氏菌的分子鉴定 青枯雷尔氏菌生理小种分化 青枯雷尔氏菌生化型分化 青枯雷尔氏菌脂肪酸型分析 青枯雷尔氏菌的基因型分化 青枯病害检测分子探针的研究与应用 研究的小结与创新点 发表论文 项目简介 国家863：茄科作物青枯病和枯萎病生防菌剂的研究与应用（2006AA10A211），2006.10-2010.10 福建省科技厅：省财政专项-福建省农业科学院科技创新团队建设基金（STIF-Y03），2007.1-2007.12 福建省自然基金：生防菌对青枯雷尔氏菌微生态选择性致弱作用的研究（2006J0320），2006.5-2008.4 细菌性青枯病是一种由青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)引起的毁灭性土传病害，是最重要的作物病害之一。 在寄主范围、地理分布、致病特征、流行特征、种下分类等方面存在较大的差异，具有明显的多态性。 目前青枯雷尔氏菌存在着各种防治手段难以完全奏效的问题，与该菌复杂的异源性及组成类型复杂有关。 青枯雷尔氏菌致病性有明显的强弱之分，强致病性菌株可引起作物发病，甚至死亡，弱致病性菌株对作物并没有危害。 学术思想 对青枯雷尔氏菌的采集、分离、保存 、青枯雷尔氏菌在不同作物体内的分布、青枯雷尔氏菌的形态特征、青枯雷尔氏菌的培养与生长等微生物学特性进行了研究，出版专著《青枯雷尔氏菌的多态性分析》，发表文章25篇。 提出了青枯雷尔氏菌脂肪酸型，建立了判别模型。 建立了青枯雷尔氏菌分化的细菌色谱鉴定体系。 青枯雷尔氏菌在细菌色谱上有2 个峰，无致病力菌株是前峰高于后峰，而强致病力菌株后峰高于前峰。吸附蛋白研究表明，无致病力菌株具有一条带，强致病力菌株有两条带。 设计了phcA 基因引物, 鉴别青枯雷尔氏菌强株、弱株进行了初步的检测。 研究基础 1、青枯雷尔氏菌的分子鉴定 根据青枯雷尔氏菌的标准菌株GMI1000 ITS1区序列（由Genbank上获取）设计引物扩增供试菌株的16S和23S之间的ITS1区序列，获得的序列进行同源比对，确定菌株的种类 。 一、青枯雷尔氏菌的分子鉴定 一、青枯雷尔氏菌的分子鉴定 一、青枯雷尔氏菌的分子鉴定 一、青枯雷尔氏菌的分子鉴定 二、青枯雷尔氏菌生理小种分化 1、青枯雷尔氏菌生化型鉴定方法 接种于分别含有乳糖、麦芽糖、纤维二糖、甘露醇、山梨醇和甜醇的标准培养基里(由杭州天和微生物试剂有限公司提供)，观察供试菌株对3种双糖和3种六碳醇的利用情况，确定菌株的生化型。 三、青枯雷尔氏菌生化型分化 Ⅳ + + + - - - Rs-E.2.1-050914-01 40 “新型” - - - + - - Rs-E.1.3-010620-05 39 Ⅰ - - - - - - Rs-E.1.3-020626-04 38 Ⅱ - - - + + + Rs-E.1.3-020626-03 37 Ⅰ - - - - - - Rs-E.1.3-020626-02 36 “新型” - - - + - - Rs-E.1.3-010719-01 35 Ⅰ - - - - - - Rs-G.1.4-010704-02 34 Ⅰ - - - - - - Rs-G.1.4-010704-01 33 Ⅱ - - - + + + Rs-P.1.4-010704-02 32 “新型” - - + - + + Rs-P.1.4-010704-01 31 “新型” - - - - + + Rs-T.1.2-010618-01 30 Ⅱ - - - + + + Rs-T.1.1-010615-01 29 Ⅲ + + + + + + Rs-T.1.3-010702-28 28 Ⅲ + + + + + + Rs-T.1.3-010702-27 27 Ⅱ - - - + + + Rs-T.1.3-010702-26 26 Ⅱ - - - + + + Rs-T.1.3-010702-25 25 “新型” - - - - + + Rs-T.1.3-010702-24 24 Ⅱ - - - + + + Rs-T.1.3-010702-23 23 Ⅱ - - -