弯曲菌属和螺杆菌属.pptVIP

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弯曲菌属 Campylobacter 是一类氧化酶阳性、动力阳性、革兰阴性弯曲、微需氧细菌。广泛分布于动物界,有些可引起动物与人类的腹泻、胃肠炎和肠道外感染等疾病。主要包括: 空肠弯曲菌(C.jejuni)——细菌性胃肠炎(经口>104感染) 胎儿弯曲菌(C.fetus)——肠外感染(心内膜炎、血栓性静脉炎,关节炎等) 大肠弯曲菌(C.coli)—— 其中空肠弯曲菌是腹泻的常见病原菌。 一、生物学特性 1.形态结构 G-,菌体弯曲弧形、S形、螺旋形或海鸥展翅形。无荚膜,无芽胞,一端或两端具有单鞭毛。运动活泼,呈投镖样为其特征。 2.培养特征 为微需氧菌(5%O2+10%CO2+85%N2); 营养要求较高,常用培养基为含血的Skirrow琼脂;CVA培养基---血琼脂为基础+抗生素(头孢哌酮+万古霉素+两性霉素);CCDA培养基---碳+头孢哌酮+去氧胆酸盐 最适生长温度37℃生长,42℃选择性好(空肠大肠生长好,其他生长不良因种)。 培养48h ,培养基上形成两种菌落:一为扁平、边缘不整齐、沿接种线扩散生长的大菌落;另一为凸起、圆形小菌落。 3.生化反应:见表 4.抵抗力不强,在室温下可迅速死亡。对热敏感,标本在4℃冰箱可保存3周。 二、致病性 1.致病因素: 肠毒素、细胞毒素和内毒素。 2.致病机理: 该菌借助于鞭毛和外膜蛋白与空肠上皮细胞结合,侵入生长繁殖,产生肠毒素、细胞毒素和内毒素等物质,引起肠炎和肠道外感染。 3.所致疾病: 腹泻,进而转为粘液脓血样便,甚至血便。有发热腹痛、恶心不适等症状。可在1周内消退,20%患者症状可持续1-3周。 三 微生物检验 标本采集 采取新鲜粪便与肛拭子、血液、脑脊液等立即送检。如不能及时送检应种入Cary-Blair运送培养基,放4℃冰箱保存。血液、脑脊液标本应先进行增菌。 直接显微镜检查 直接镜检查菌体;或用暗视野或相差显微镜观察,查运动;可初步诊断。 核酸检测 PCR方法直接检测粪便标本中的弯曲菌。 分离培养 粪便或肛拭标本直接接种选择平板 血、脑脊液标本先增菌后转种分离培养基 微氧环境 空肠/大肠弯曲菌最适生长温度42~43℃,24h可观察菌落,如于37℃培养则需48~72h 胎儿弯曲菌于25℃和37℃均可生长 临床标本需分别置37℃和42℃中培养,方不致漏检。 鉴定要点: 氧化酶阳性,革兰阴性,菌体弯曲或呈S形。 生长温度 (25℃、37℃、42℃)试验; 奈啶酸、头孢噻吩敏感试验 空肠弯曲菌对奈啶酸敏感、对头孢噻吩耐药; 胎儿弯曲菌对奈啶酸耐药、对头孢噻吩敏感。 醋酸吲哚水解试验 空肠弯曲菌阳性,胎儿弯曲菌阴性 马尿酸盐水解试验 有助于鉴定空肠弯曲菌空肠亚种 凡马尿酸盐水解试验阳性、42℃生长、氧化酶阳性、与镜检形态相符者,即可报告空肠弯曲菌空肠亚种 其他方法测定 免疫学方法 用特异性抗体包被的乳胶颗粒,可用于鉴定空肠/大肠弯曲菌。也可采用酶免疫方法测定粪便中弯曲菌抗原进行诊断。血清中抗体测定用于流行病学调查 DNA探针和PCR扩增 DNA-DNA杂交在弯曲菌菌种的分类研究中是一种成功的参考方法。 PCR扩增技术也正在发展中 第二节 螺杆菌属(Helicobacter) 螺杆菌属细菌有20余种,有9个种可从人体分离到。与人类关系密切的主要是幽门螺杆菌(H. pylori) 幽门螺杆菌 (Helicobacter pylori) 分类 最初因形态、分离培养方法与弯曲菌属细菌相似,又仅从胃标本中分离到,被称作胃弯曲菌样细菌 由于此菌在胃窦部多见,且形态、培养及某些生化特性与弯曲菌属相似,DNA G+Gmol%也在弯曲菌属范围内,故命名为幽门弯曲菌(campylobacter pylori) 1989年Goodwin等根据该菌的超微结构、形态、菌体脂肪酸组成、生长特征和酶的活力、16S rRNA 序列等,提出该菌不应归于弯曲菌属,后称为幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, HP) 一、生物学特性 1.形态染色:G- ,菌体弯曲呈螺旋型、弧形、S形、海鸥形。一端或两端有多根鞭毛(从毛菌),运动活泼有动力。鞭毛在定居中起锚住作用。 二、致病性 1.传染源与传播方式: 人类是HP感染的主要传染源; 传播途径----经口 2.HP感染与疾病的关系 慢性胃炎 胃溃疡 胃癌 3.致病机制尚不清楚 特殊的运动方式利于细菌穿过黏液层; 分解尿素产氨中和菌体周围胃酸,有助于定植; 细胞毒素相关蛋白(cagA)和空泡毒素(vacA) ; VacA在体外能诱导多种哺乳动物细胞发生空胞变性,体内导致小鼠胃粘膜上皮细胞损伤和溃疡形成。

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