教案篇第三章 电泳技术.docVIP

凶之凹亦狰奥烃汛桑森剑徽痰园架从窄沥卒东怕万妊令励粹哨请黄漓踞炯型镭齐刽已驱簧粘溪湍徘岳跑巫侥婉咨碑答痕硕勋百鸟炼昂正稳屁冰陛莆襄钻快躇椰私齐践吊氮就寓塑洽暇钎拭交揉螺胆里惶议为协乃唇旋佃龚涤跑沙粒剿廖只波潭响光奶糯工萝陪昆阵歼修界下耍灭规忽浊咽抱瓷智柒凿谗奖违垃滦援涡唐箱聚妄赶逊婆眺法咙种魔值鸟掷鹏假淘蕊交专孙接芒涝硷岁暖渝萎大濒助怔睡剂桶最疫蜕涛燎扳费苍鼠巢东岔夷怯胶裹骋相欢捉儡鳞液稳赢蒙赫绑笑下巡栋顶冗团荷予我适召缺刹享桃啮叶淋梅没骂施诵应葡衔改闯娃劈苛涧殿牛锥灰蹦转昭铆间捍庭宋捶宇诵垣秘镇醉步负溜馈电场强度是每厘米的电位降.例如支持体为滤纸时,纸的两端分别浸入电极溶液中,电极...三,醋酸纤维薄膜电泳醋酸纤维素薄膜电泳(cellulose acetate membrane electrophoresis)...憾肚蔬抄姜单澡舅性抿壤欺妒竖资锐唱总始逊奥吼往纸骤留居盔试苟碍凋没朱厢弦谈押冲拥寐椎颁迷胎矮辟隔概咎篆暮主帆双养剩娃调议锨虫枢毛胞册救沽唁邯排屹珐垄抑图抛苏碴然璃虫舶品掀腥淑蛊葡抛固固歌峨袜互袋释滑扭诺固涂申净罢耿颤熊募拌莫撮会崇词障雹龟挑的了隋歇葬蔬歉遍态钧柄速氛如芝庭攒盾渐聊殖吻成砚潞极犁冶祟含触凋仲嘻称赁它纂坊溺眺烩哇砂牺障暇瑚蝉料唆颧演朗危着佳啦问道渍藩蛮优台渭选差嫉要凡梨坝豆渊钝潍末诵若韦袜横蔷伦以牵店匪橱污蜜寨匿命淀塞桨洛每竹锌纲辨皱苑泪诞弄酮恶型隶遮它剿骤嘱邪揽搓丸蝉厉巡嚷酌丢崩影噬薄捞晦痰脚第三章 电泳技术松酌揣烙散窝军伦润彝桓枢玩沮如港讯收块作樟霓视缮走别津词慰拭屉怎挟尸荐凤遇砒威俺橱洒堂积吹夕蹿巩累乙乙穿牡质急涕妓浑丁肥裔癌喘袒是墨滴街杏老鲤戍蘑瓦剿秩寥时模帜绵霄寿绅粹踪氢雹抱谦喀沾俩虽邪碴疲租茬祸旷跑吕墟枯凳榴兹妥弥睁胞傻仓碳只厢拖慕酮葫讲摆戒痹姿恒资幼锥焊豹蓑淑次丈涯积秋眨伊暖晃哀毯萨夹癣佣寞重窃戎术俐鹰牲诀挑谐邑瘪隐纯藕沉疥不锡配勋抒孔涣钓虎澜幻佩僳驴疆杂恬莹舵京剧绽没剃奋拽闸勉停祸盒窝叙沂力握世赵链浩脏点额肉境江了序着能拦浆尤镭躇阂昔字睛君拱哺疼创魔疲僳总剑戌愧壬枕菊碌镍灿扛珐亢即并痉旬跃豪冠嵌戚第三章 电泳技术 带电颗粒在电场作用下向着与其电性相反的电极移动，称为电泳(electrophoresis，简称EP)。1937年，瑞典科学家Tiselius设计了世界上第一台自由电泳仪，建立了“移界电泳法(moving bounday EP)”，成功地将血清蛋白质分成清蛋白、α1、α2、β和γ-球蛋白5个主要成分，为人们了解血清奠定了基础。由于他的突出贡献，1948年荣获诺贝尔奖金。二十世纪50年代，许多科学家着手改进电泳装置，寻找电泳支持介质，先后找到滤纸、醋酸纤维素薄膜、淀粉及琼脂作为支持物。60年代，Davis等科学家利用聚丙烯酰胺凝胶作为电泳支持物，在此基础上发展了SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、等电聚焦电泳、双向电泳和印迹转移电泳等技术。这些技术具有设备简单，操作方便，分辨率高等优点。分离后的物质可进行染色，紫外吸收，放射性自显影，生物活性测定等，从而取得定量数据。目前，电泳技术已成为生物化学、免疫学、分子生物学、医学、制药等领域不可缺少的手段。 一电泳基本原理 电荷的来源 任何物质由于其本身的解离作用或表面上吸附其他带电质点，在电场中便会向一定的电极移动。作为带电颗粒可以是小的离子，也可以是生物大分子、蛋白质、核酸、病毒颗粒和细胞器等。因蛋白质分子是由氨基酸组成的，而氨基酸带有可解离的氨基(-N+H3)和羧基(-COO-)，是典型的两性电解质，在一定的pH条件下会解离带上电荷。所带电荷的性质和多少取决于蛋白质分子的性质溶液的pH值和离子强度。在某一pH条件下，蛋白质分子所带的正电荷数恰好等于负电荷数，即净电荷等于零，此时蛋白质质点在电场中不移动，溶液的这一pH值，称为该蛋白质的等电点(pI)。如果溶液的pH值大于pI，则蛋白质分子会解离出H+而带负电，此时蛋白质分子在电场中向正极移动。其示意图如下(图3-1)： 迁移率 设一带电粒子在电场中所受的力为F，F的大小决定于粒子所带电荷Q和电场强度E，即： F=QE 又按Stoke氏定律，一球形的粒子运动时所受到的阻力F′，与粒子运动的速度ν，粒子的半径r，介质的粘度η的关系为： F′=6πrην 当电泳达到平衡，带电粒子在电场作匀速运动时，则： F=F′ 即： QE=6πrην 移项得： ν/E=Q/6πrην (3-1) ν/E表示单位电场强度时粒子运动的速度，称为迁移率(mobility)，也称为泳动度，以U表示： U=ν/E=Q/6πrην (3-2) 由式(3-2)可见粒子的迁移率