细胞工程原理课件.pptVIP

2、植物组织培养技术的初步形成（1930-1960年） 1933年，我国植物生理学家李继侗培养银杏胚胎，并发现银杏胚乳提取液可促进离体胚的生长。 1937年，White发现B族维生素对离体根培养的重要性。并指出IAA对植物生长发育的控制起重要作用。 1937,1938年，Gantheret在培养基中加入上述生长因子，使得柳树形成层诱导形成的愈伤组织连续生长。Nobecomt对烟草种间杂种茎段的形成层细胞培养也得到了类似的结果。 1948年，Skoog等通过对烟草茎段和髓培养发现，不定芽和不定根的发生由生长素/腺嘌呤的比例决定。 1950年，Ball从红杉愈伤组织培养中再生获得器官。 1952年，Morel和Martin通过分生组织培养获得大丽花的脱毒植株，同年，首次应用微型嫁接技术。 1953年，Tuleche首次从花粉培养中获得银杏的单倍体愈伤组织。 1955年，Miller等发现了一种促进细胞分裂的植物激素—激动素，后来发现激动素可用来代替腺嘌呤促进芽的形成，而且其效力比后者高3万倍。 1957年，Skoog和Miller发现改变细胞分裂素/生长素比例，可以控制根和芽的发生。 1958年，Maheshwari和Rangaswamy从柑橘胚珠的珠心组织培养中再生获得体细胞胚；同年，Reinert 和Steward分别从胡萝卜的愈伤组织和细胞培养中再生得到原胚，为以后的组织培养中器官发生和体细胞胚胎发生奠定了基础，也为植物细胞全能性理论提供了证据。 3、植物组织培养技术的发展（1960年以后） 1960年，Morel利用兰花茎尖培养对兰花进行营养繁殖； 1962年，Murashige和Skoog开发出最著名的Murashige和Skoog培养基（MS基本培养基），并被后来广泛采用的基本培养基。 1964年，印度人Guha和Maheshwari利用曼陀罗花粉培养获得第一例单倍体植株。从而开辟了单倍体育种技术。 1971年，Takebe等获得第一例原生质体培养的再生植株。 1972年，Carlson等利用原生质体融合在两个烟草属中进行种间杂交。 1974年，Murashige等利用细胞分裂素诱导茎尖侧芽分枝。Zaenen和Larebeke分别发现土壤农杆菌（Agribacterium）中的根瘤诱导的主要成分是Ti质粒。 1978年，Melchers等进行了番茄和马铃薯的体细胞杂交。 1979年，Marton提出了利用植物原生质体和土壤农杆菌共培养的方法进行转化。 1981年，Larkin和Scowcroft引入“体细胞无性系变异（Somaclonal variation）”这一术语。 1982年，Krens等的工作证明，原生质体可以摄入裸露的DNA，表明可以用外源DNA对原生质体进行遗传转化。 1982年，Zimmermann利用电刺激进行原生质体融合。 1985年，Horsch等用土壤农杆菌对叶盘进行感染和转化，并得到再生的转化植株。 五、植物组织培养技术的应用 1、优质种苗的快速无性繁殖： （1）无性繁殖作物及不易繁殖作物的快速繁殖 园艺植物种苗工厂化生产 兰科植物生产 A B E C F G 花烛属植物 厥类植物 盆栽及切花植物的繁殖 珍贵树种 无菌苗快速繁殖 无菌苗驯化 组培苗驯化移栽 茎、芽和小植株的规模培养 经济植物快速繁殖 （2）通过茎尖培养生产脱毒健康种苗：如草莓、香蕉、 甘蔗、马铃薯、大蒜等。 virus-free tissue 茎尖培养脱毒 脱毒马铃薯种薯生物反应器液体培养 2、用于植物遗传育种 包括种质资源离体保存；花粉花药培养产生单倍体；胚乳培养产生三倍体；胚培养拯救杂种胚克服远缘杂交障碍；原生质体培养进行体细胞杂交；植物体细胞无性系变异诱导和筛选；用于植物基因转移操作等。 种质资源的离体保存 体细胞无性系变异筛选 花粉、花药培养产生单倍体植株 幼胚拯救克服远缘杂交障碍 用于基因工程技术创造植物新种质。 3、大规模植物细胞、组织和器官培养生产次生代谢物质； 根培养:正常根培养， 毛状根培养 4、用于植物生长发育理论研究，包括生理学、病理学、胚胎学和细胞与分子生物学等。 植物胚胎发生理论研究 生长发育特性研究 大蒜根尖培养及植株再生 大蒜试管鳞茎诱导 人参细胞悬浮培养 非洲紫罗兰原生质体分离、培养及植株再生 2、根据再生途径分为： （1）器官发生途径（Organogenesis）： 直接器官发生途径：植物器官可以直接由外植体上诱导。如茎尖培养。 间接器官发生途径：成熟细胞经过脱分化（dedifferentiati