(浙江大学研究生质谱课件)质谱-第二讲.ppt

# 大气压化学电离源（Atmosphere Pressure CI)APCI APCI 为大气压力化学电离源，样品先形成雾，然后电晕放电针对其放电，在高压电弧中，样品被电离，然后去溶剂化形成离子，最后检测，对极性小的样品效果较好。 ESI 为电喷雾，即样品先带电再喷雾，带电液滴在去溶剂化过程中形成样品离子，从而被检测，对于极性大的样品效果好一些 ESI 的软电离程度较APCI 的还小，但其应用范围较APCI 的大，只有少部分ESI 做不出，可以用APCI 辅助解决问题，但是APCI还是不能解决所有ESI 解决不了的问题。 大气压化学电离源主要用来分析中等极性的化合物。有些分析物由于结构和极性方面的原因，用ESI不能产生足够强的离子，可以采用APCI方式增加离子产率，可以认为APCI是ESI的补充。APCI主要产生的是单电荷离子，所以分析的化合物分子量一般小于1000Da。用这种电离源得到的质谱很少有碎片离子，主要是准分子离子。? ? APCI与ESI源都能分析许多样品，而且灵敏度相似，很难说出哪一种更合适。同时至今没有一个确切的准则判断何时使用某一种电离方式更好。但是通常认为电喷雾有利于分析生物大分子及其它分子量大的化合物，而APCI更适合于分析极性较小的化合物。? ? APCI源不能生成一系列多电荷离子，所以不适合分析生物大分子。而ESI源由于它能产生一系列的多电荷离子，特别适合于蛋白质，多肽类的生物分子。 ESI和APCI共同点:1、使用高电压元件和雾化气喷雾法产生离子2、通常产生(M+H)+或(M-H)-等准分子离子3、产生极少的碎片，但可以控制产生结构碎片 ４、非常灵敏的电离技术。不同点:1、生成离子的方式不同，ESI：液相离子化； APCI：气相离子化2、样品兼容性ESI：极性化合物和生物大分子APCI：非极性，小分子化合物（相对ESI而言）且有一定挥发性3、流速兼容性ESI：0.001到1ml/minAPCI：0.2到2ml/min 4、ESI的适用范围要远远大于APCI APCI优点∶ 1.利用所得到[M+1]+及[M-1]–进行分子量确认2.源参数调整简单，容易使用3.耐受性好，喷雾器及针的位置不关键4.LC流速可达2.0ml/min5.好的灵敏度 缺点：1.有限的结构信息2.易发生热裂解3.低质量时化学噪声大4.不适合做分子量大于1000的化合物 25 Years of LCMS Interfaces Moving belt interface(EI and CI, library searchable) Dynamic FAB(low flow rates, very fiddly) Thermospray (TSP)Ionization(first widely used LC/MS interface) Atmospheric Pressure Ionization (ESI and APCI) 5. 基质辅助激光解吸电离 Matrix Assisted Laser Desorption/Ionization (MALDI) --来源于ＬＤＩ技术，而ＬＤＩ曾用于 分析非挥发性有机物质分子，尤其是合 成聚合物及热不稳定生物小分子的研 究，但ＭASS RANGE《３０００。 　　原因是只有化合物能较好吸收激光 才能解析，对于吸收不好只有加大辐 射，但这样的大能量沉积在化合物上就 会破坏其结构，大分子量化合物的分析 受到限制。 1988年，Tanaka, Hillenkamp 分别提出了基质辅助以获得大分子信息的方法。 方法：将样品加入能强烈吸收激光的基质中，基质将激光 的能量传递给样品，以产生分子离子，从而避免了直接照射 分析物的限制。 ?　基本原理： 样品与基质混合 形成固体溶液 进入离子源 照射激光 基质吸收激光传递给样品 样品被激发产生离子 分析器 基质的具体作用 　　 　A:溶剂－－样品分子被彼此分开，该分离减弱了样品分子间的相互作用。 　 　Ｂ：传递能量，协助激发离子－－基质分子从激光脉冲中吸收能量并转化成固态溶体体系的激发能，使微量样品产生瞬间相变。 基质研究是一个热点　ＤＨＢ等 　ＭＡＬＤＩ的特点： 　　1) 质量检测范围大，理论上无上限 　　 尿激酶　　272000Ｄa 2) 灵敏度高　１pm 以下。 　　３）样品损耗少 　　４）准确度与分辨率取决其联用的分析器 　样品要求 　　MALDI 对样品的要求很低，能忍受高浓度的 盐，缓冲剂和其他非挥发性成分