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 丰产梨遗传转化条件的优化# 5 10 15 20  摘要：以丰产梨组培苗幼叶和再生植株为试材，研究了卡那霉素对丰产梨叶片不定芽产生和 植株再生的影响，以及 AgNO3 和乙酞丁香酮（AS）对丰产梨叶片再生不定芽的影响。用继 代十天左右的新梢顶部新展开叶片制备外植体，分别接种在 NN69+BA5mg/L+NAA0.3mg/L +蔗糖 30.0g/L+琼脂 6.0g/L 的再生培养基上，添加不同浓度的卡那霉素，同时筛选 AgNO3， 以及乙酞丁香酮的浓度。结果表明：15mg/L 卡那霉素就极显著的抑制丰产梨叶片再生，再 生植株对 Kan 的耐受能力略高于叶片，在 25mg/L 浓度下，完全白化，生长完全被抑制；AgNO3 浓度在 4.5 mg/L 对叶片再生有一定的促进作用，乙酞丁香酮在 20mg/L 对转化有较大的促进 作用。 关键词：植物学；离体叶片；再生；丰产梨 中图分类号：Q37 Optimization of the Transformation System of ‘Fertility’ Pear Wang Lu1, Gao Yujiao1, Cheng Nini1,2, Zhang Yuanhu1 (1. State Key Laboratory of Crop Biology/College of Life Science,Shandong Agricultural University,Taian 271018; 2. College of Life Science,Linyi University,Linyi 276000) 25 Abstract: seedling young leaves and regeneration plant of fertility pear were selected as materials. Effects of kanamycin on plantlet regeneration and adventitious bud regeneration from in vitro leaves, and effects of AgNO3 and AS on plantlet regeneration were studied. Leaves on the top of shoots of pear were cultured on NN69 medium containing BA5.0mg/L, NAA0.3mg/L, sucrose 30.0g/L, agar6.0g/L and several kinds of doses of antibiotics, AgNO3 and AS respectively. 30 35 40 Results showed that Kanamycin strongly inhibited regeneration even at a does of 15 mg/L, but inhibited proliferation of shoots at a dose of 25 mg/L; AgNO3 at a dose of 4.5mg/L and AS at a dose of 20mg/L could help the regeneration.. Key words: Botany; leaves in vitro; regeneration; fertility pear 0 引言 梨是我国传统的果品。我国梨的栽培历史悠久，是东方梨的主要生产国，是世界梨的原 产中心之一。梨的果实因其含有人体所需的多种营养成分及其各种良好的口味而深受人们的 喜爱。丰产梨是西方梨的一种，在低温贮藏后期易发生虎皮病，严重影响其外观品质和经济 价值，因此培育耐贮存和高产优质的梨树品种是生产中函待解决的问题。由于童期长和基因 高度杂合两大特点使其传统的有性杂交育种成效低，工作量大。如何缩短育种时问和提高育 种效率成为梨树育种工作者长期追求的目标。随着分子生物学，特别是组织培养和基因工程 技术的不断进步，利用生物技术进行育种已成为可能。梨叶片高效再生受多种因素的影响。 -1-  基因型是决定不定芽再生的根本因素，表现为种间、品种间再生能力的差异。不同品种间每 片叶再生芽数差异显著[1,2,3]。基本培养基是影响梨叶片再生的重要因素。许多研究表明，组 45 50 55 60 织培养中广泛使用的 MS 培养基并不适合梨叶片不定芽的诱导，而以 NN69 为最佳培养基 [4,5] 表明基本培养基、细胞分裂素和生长素对梨不定梢的诱导具有协同效应。大量相关试验表明， 组织培养中广泛使用的 MS 培养基普遍不适于梨叶片不定梢的诱导，而用