氟对小胶质细胞过度产生活性氧自由基作用的研究.docVIP

 氟对小胶质细胞过度产生活性氧自由基作 用的研究# * 5 10  摘要：目的： 观察氟作用下小胶质细胞氧化应激状况，为进一步研究氟致中枢神经系统损 伤机制提供实验依据。方法：用 1、10 和 50mg/L 的 NaF 处理 BV-2 小胶质细胞 24h 后,检测 细胞内活性氧（ROS）、超氧阴离子自由基（O2-·）和硝基酪氨酸（NT）含量。结果：BV-2 小胶质细胞细胞染毒 24h 后，50mg/L NaF 处理的细胞内 ROS 含量显著高于对照组（p0.01）； 1、10 和 50 mg/L NaF 染毒组细胞内 O2-·含量均显著高于对照组（p0.05）；10 和 50 mg/L NaF 处理的细胞内 NT 也显著高于对照组，三种活性氧自由基产物的含量均与染氟浓度呈显著地 正相关关系。结论：氟能激活小胶质细胞，使其产生较多的活性氧自由基，可能在氟所致的 中枢神经系统损伤中起一定的作用。 关键词：关氟；小胶质细胞；ROS；O2-· ；NT 15 The Study on Generation of Reactive Oxygen and Free radicals in Fluoride-Treated BV-2 Microgla Cells Yan Ling, Liu Ziyou, Wang Fei, Liu Shengnan, Yan Nan, Xi Shuhua (School of Public Health,China Medical University, ShenYang 110001) 20 25 30 35 Abstract: Objective: Observing oxidative stress of BV-2 microglia after treated by fluoride. Methods: BV-2 microglia cells were treated with 1, 10 and 50 mg/L NaF for 24h, and intracellular ROS, O2-· and nitrotyrosine (NT ) were measured. Results: Contents of ROS and O2-· increased in NaF-treated cells as compared with control cells, NT concentrations also increased significantly in 10 and 50 mg/L NaF-treated cells compared with the control cells. The contents of intracellular ROS, O2-· and NT significantly increased with fluoride concentrations in a dose-dependent manner. Conclusion：Fluoride could activate microglia and induce microglia to produce more ROS and free radicals, which possibly resulted in central nervous system damage. Keywords: fluoride; microglia; ROS; O2-·; NT 0 引言 氟（F）是反应活性极强的负电性元素，在自然界中广泛分布，是生物体必需的微量元 素之一。然而，世界上有 50 多个国家和地区，由于岩石土壤中氟含量过高，导致地方性氟 中毒的发生。氟中毒除了引起氟斑牙和氟骨症外，一些氟中毒患者常伴有神经系统症状，表 现为头痛、头晕、记忆力减退等中枢神经系统功能障碍症状。目前研究较多的是慢性氟中毒 引起的智力改变，认为高氟摄入与儿童智商呈显著负相关[1,2]。由于氟的反应活性极强，可 直接攻击氧，干扰氧代谢，影响抗氧化酶的活性，导致活性氧、自由基增多，引起细胞损伤。 研究显示，过量氟摄入的大鼠脑组 ROS、自由基明显增高，抗氧化水平下降[3,4]。小胶质细 胞是脑组织中的免疫细胞，一些内外因素均可使其激活，活化后的小胶质细胞可通过 NADPH 氧化酶和诱导性一氧化氮合酶（iNOS）产生大量的 ROS，是脑组织活性氧和活性氮的来源 -1-  40  [5-7]  。因此，小胶质细胞活化后，通过诱导神经元氧化应激而产生神经毒性作用。来源于 NADPH 氧化酶的 O2-·能与 iNOS 催化产生的 NO 反应生成过氧亚硝酸阴离子(ONOO- )， ONOO-能与生物大分子结合引起 DNA 断裂