邻菲罗啉分光光度法测定水中微量铁2.pptVIP

一、实验目的 二、实验原理 三、主要仪器与试剂 四、实验步骤 五、数据记录及结果处理 六、思考题 七、注意事项 * 化学与环境工程学院 School of Chemical and Environmental Engineering 上海应用技术学院 分析化学实验 上海应用技术学院 分析化学实验 * 化学与环境工程学院 School of Chemical and Environmental Engineering * 邻菲罗啉分光光度法 测定水中微量铁 1．了解分光光度计的结构和正确的使用方法； 2．学习吸收曲线的制作方法，理解最大吸收波长的意义； 3．掌握朗伯比尔定律的应用。 在pH约为5的HAc-NaAc缓冲溶液中，Fe2+与邻二氮菲(phen)生成稳定的橙红色络合物，λmax＝510nm, ε＝1.1×104L/(mol·cm)。在510nm处吸光度与其浓度成正比，符合朗伯-比尔定律，用标准曲线法可求得试样中微量Fe2+的测定。 如果铁以Fe3+的形式存在，应预先加入盐酸羟胺将Fe3+还原成Fe2+。 1．仪器 722型分光光度计、 10mL吸量管，50mL容量瓶。 2．试剂 (1) 铁标准溶液（含铁 100μg/mL）； (2) 0.1%邻菲罗啉溶液 ； (3) 5%盐酸羟胺溶液 ； (4) HAc-NaAc缓冲液（pH=4.6）。 1．邻菲罗啉-亚铁吸收曲线的绘制 准确吸取铁标准溶液（含铁 10μg/mL，用含铁 100μg/mL 配制）4mL于50mL容量瓶中，依次加入5mL HAc-NaAc缓冲液、2mL盐酸羟胺溶液、5mL邻菲罗啉溶液，用水稀释至刻度，摇匀，放置10分钟。以水作参比溶液，用1cm比色皿和722型分光光度计在?=440-600nm分别测定吸光度A。 以所得吸光度A为纵坐标，相应波长λ为横坐标，在坐标纸上绘制A与λ的吸收曲线。从吸收曲线上选择测定铁的适宜波长，一般选用最大吸收波长λmax为测定波长。 2．标准曲线的绘制 准确吸取铁标准溶液（含铁10μg/mL）0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 mL于六个50mL容量瓶中，依次加入5mL HAc-NaAc缓冲液、2mL盐酸羟胺溶液、5mL邻菲罗啉溶液，用去离子水稀释至刻度，摇匀，放置10分钟。以不加铁的试剂溶液作参比，用1cm比色皿，在λmax处分别测定吸光度A。 以显色后的50mL溶液中的含铁量(μg)为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制测定铁的标准曲线。 3．试样中微量铁的测定 准确吸取试样10mL于50mL容量瓶中，按照绘制标准曲线的实验步骤，配制溶液并测定吸光度Ax，从标准曲线上查出对应的铁的质量，并求原试样中铁含量的浓度（μg/mL）。 1．吸收曲线绘制和测量波长选择 由吸收曲线可得，λmax= nm。 2．标准曲线的绘制和铁含量的测定 若由标准曲线上查出对应的铁含量为cx ， 则原试样中铁含量的浓度cFe计算： 1．参比溶液的作用是什么？ 2．溶液酸度对测定有何影响？ 3．制作标准曲线和进行其他条件实验时，加入试剂的 顺序能否任意改变？为什么？ 1．为了防止光电管疲劳。不测定时必须将比色皿暗箱盖打开，使光路切断，以延长光电管使用寿命。 2．比色皿使用注意事项： 1）每台仪器与比色皿配套，不能与其它仪器上的比色皿调换； 2）拿取比色皿时，手指不能接触其透光面； 3）装溶液时，先用该溶液润洗比色皿内壁2～3次，被测溶液以装 至比色皿的3/4高度为宜，并用滤纸轻轻吸去比色皿外部的液 体，再用擦镜纸小心擦拭透光面，直到洁净透明； 4）测定系列溶液时，通常按由稀到浓的顺序测定； 5）实验完毕，及时把比色皿洗净、晾干，放回比色皿盒中。 * 化学与环境工程学院 School of Chemical and Environmental Engineering 上海应用技术学院 分析化学实验