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2025年免疫学免疫功能测定专项考察题及答案解析

一、单项选择题（每题2分，共20分）

1.评估体液免疫功能时，最能反映特异性免疫应答能力的组合指标是：

A.血清总IgG水平+B细胞绝对计数

B.IgG亚类分布+破伤风类毒素特异性抗体滴度

C.IgM水平+CD19+B细胞比例

D.血清补体C3水平+浆细胞计数

答案：B

解析：体液免疫功能评估需兼顾免疫球蛋白的亚类分布（反映B细胞分化成熟能力）和特异性抗体滴度（反映抗原刺激后的应答效能）。总IgG水平可能受非特异性多克隆增殖影响（如慢性炎症），B细胞计数仅反映数量而非功能；IgM和CD19+B细胞比例主要提示初始B细胞状态；补体C3和浆细胞计数与体液免疫的特异性关联较弱。破伤风类毒素作为回忆抗原，其抗体滴度可直接评估记忆B细胞的应答能力，因此B为最佳组合。

2.流式细胞术检测Th1/Th2细胞比例时，需同时标记的细胞内细胞因子是：

A.IFN-γ（Th1）与IL-4（Th2）

B.IL-2（Th1）与IL-10（Th2）

C.TNF-α（Th1）与IL-5（Th2）

D.GM-CSF（Th1）与IL-13（Th2）

答案：A

解析：Th1细胞主要分泌IFN-γ、IL-2，介导细胞免疫；Th2细胞主要分泌IL-4、IL-5、IL-13，介导体液免疫。其中IFN-γ和IL-4是Th1/Th2分化的关键标志性细胞因子，可通过胞内染色区分两类辅助性T细胞亚群。IL-10主要由调节性T细胞（Treg）或Th2细胞分泌，特异性较低；TNF-α和GM-CSF可由多种免疫细胞产生，并非Th1专属；因此A为正确选项。

3.免疫功能测定中，样本采集后放置超过6小时对检测结果的影响主要是：

A.补体活性升高，干扰体液免疫指标

B.淋巴细胞凋亡增加，影响流式细胞计数

C.红细胞溶解减少，改善单细胞悬液质量

D.血清细胞因子浓度因降解而显著升高

答案：B

解析：外周血样本采集后需在4小时内处理（2-8℃保存不超过24小时），超过6小时会导致淋巴细胞（尤其是T细胞）凋亡率增加（AnnexinV阳性率上升约15-20%），流式细胞术检测的CD3+、CD4+等亚群绝对计数会显著降低（误差10%）。补体在室温下易降解（活性下降）；红细胞溶解过度会释放血红蛋白干扰检测；细胞因子（如IL-6、TNF-α）可能因活化的单核细胞持续分泌而浓度升高（而非降解），但此为次要影响。因此B为正确选项。

4.用于评估T细胞受体（TCR）克隆多样性的金标准技术是：

A.流式细胞术检测CDR3长度分布

B.单细胞RNA测序（scRNA-seq）分析TCRV(D)J区

C.定量PCR检测TCRγ链重排

D.质谱流式细胞术（CyTOF）检测TCR表面表达

答案：B

解析：TCR克隆多样性反映T细胞对不同抗原的识别能力，核心是TCRβ链（或γδTCR）的V(D)J区重排多样性。单细胞RNA测序可直接捕获单个T细胞的TCRα和β链转录本，通过生物信息学分析V、D、J基因片段的组合及CDR3区序列，精确计算克隆丰度和多样性指数（如Shannon指数）。流式细胞术仅能检测CDR3长度分布（分辨率低，无法区分序列差异）；定量PCR仅针对特定亚家族；质谱流式无法解析TCR序列。因此B为金标准。

5.自身免疫性甲状腺炎患者出现免疫功能紊乱时，最可能异常的指标是：

A.CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例降低

B.CD8+T细胞绝对计数显著升高

C.NK细胞杀伤活性（CD107a表达）增强

D.血清IgE水平1000IU/mL

答案：A

解析：自身免疫病的核心机制是免疫耐受破坏，Treg细胞（CD4+CD25+Foxp3+）通过抑制自身反应性T细胞活化维持耐受。自身免疫性甲状腺炎（如桥本甲状腺炎）患者Treg细胞比例常降低（较健康对照下降20-30%），导致Th1/Th17细胞过度活化，攻击甲状腺组织。CD8+T细胞升高多见于病毒感染；NK细胞活性增强与肿瘤免疫相关；IgE升高主要见于过敏或寄生虫感染。因此A正确。

二、简答题（每题10分，共30分）

1.简述流式细胞术检测T细胞亚群与ELISA检测血清细胞因子在原理、样本要求及临床应用上的差异。

答案：

（1）原理差异：流式细胞术基于荧光标记的特异性抗体与细胞表面或胞内抗原结合，通过激光激发荧光信号，经流式细胞仪检测细胞的散射光和荧光强度，实现对单个细胞表型的定性/定量分析；ELISA基于抗原-抗体-酶标抗体的夹心反应，通过酶催化底物显色，检测血清/血浆中可溶性细胞因子的浓度