林木干旱胁迫 NAC 靶基因验证酵母单杂交与双荧光素酶联合开源试题库及答案.docVIP

林木干旱胁迫NAC靶基因验证酵母单杂交与双荧光素酶联合开源试题库及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.酵母单杂交主要用于研究（）

A.蛋白质相互作用

B.DNA与蛋白质相互作用

C.蛋白质与RNA相互作用

D.细胞间通讯

答案：B

2.双荧光素酶报告基因检测中，常用的两种荧光素酶是（）

A.萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶

B.细菌荧光素酶和萤火虫荧光素酶

C.海肾荧光素酶和细菌荧光素酶

D.水母荧光素酶和萤火虫荧光素酶

答案：A

3.在林木干旱胁迫研究中，NAC基因主要作用于（）

A.光合作用调节

B.胁迫响应调控

C.细胞分裂促进

D.呼吸作用增强

答案：B

4.构建酵母单杂交文库时，常用的载体是（）

A.pUC19

B.pGADT7

C.pET28a

D.pBR322

答案：B

5.酵母单杂交筛选阳性克隆依据是（）

A.抗生素抗性

B.颜色变化

C.生长状态

D.荧光信号

答案：C

6.双荧光素酶实验中，海肾荧光素酶的作用是（）

A.作为内参，校正实验误差

B.作为目的基因表达标记

C.检测启动子活性

D.促进蛋白质表达

答案：A

7.用于提取林木总RNA的常用试剂是（）

A.SDS

B.CTAB

C.Tris

D.EDTA

答案：B

8.在克隆NAC基因时，PCR反应的引物设计依据是（）

A.基因全长序列

B.保守序列

C.启动子序列

D.终止子序列

答案：B

9.以下哪种技术可用于验证NAC蛋白与靶基因启动子结合（）

A.酵母双杂交

B.凝胶迁移实验

C.免疫共沉淀

D.荧光定量PCR

答案：B

10.酵母单杂交诱饵载体构建需要（）

A.目的基因编码区

B.目的基因启动子区

C.目的基因终止子区

D.随机DNA片段

答案：B

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.酵母单杂交体系组成包括（）

A.诱饵载体

B.猎物载体

C.报告基因

D.筛选培养基

答案：ABCD

2.双荧光素酶实验中，影响实验结果的因素有（）

A.细胞转染效率

B.培养条件

C.荧光素酶底物浓度

D.仪器检测误差

答案：ABCD

3.林木干旱胁迫相关的生理变化有（）

A.气孔关闭

B.渗透调节物质积累

C.活性氧增加

D.光合作用增强

答案：ABC

4.克隆NAC基因可采用的方法有（）

A.RT-PCR

B.基因组文库筛选

C.cDNA文库筛选

D.化学合成

答案：ABCD

5.验证NAC靶基因的方法有（）

A.酵母单杂交

B.双荧光素酶实验

C.染色质免疫沉淀

D.基因过表达分析

答案：ABCD

6.酵母细胞转化常用的方法有（）

A.化学转化法

B.电转化法

C.热激转化法

D.农杆菌介导转化法

答案：AB

7.构建双荧光素酶报告基因载体需要的元件有（）

A.目的基因启动子

B.萤火虫荧光素酶基因

C.海肾荧光素酶基因

D.终止子

答案：ABCD

8.影响酵母单杂交筛选效率的因素有（）

A.诱饵蛋白毒性

B.文库质量

C.筛选压力

D.培养时间

答案：ABCD

9.荧光定量PCR可用于检测（）

A.NAC基因表达量

B.靶基因表达量

C.内参基因表达量

D.载体拷贝数

答案：ABC

10.在林木干旱胁迫研究中，基因功能验证常用方法有（）

A.基因敲除

B.基因沉默

C.基因过表达

D.基因编辑

答案：ABCD

三、判断题（每题2分，共10题）

1.酵母单杂交可以直接验证蛋白质与蛋白质的相互作用。（×）

2.双荧光素酶实验中，萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶表达量始终相同。（×）

3.NAC基因在所有植物中功能都一样。（×）

4.构建酵母单杂交文库时，不需要对cDNA进行处理。（×）

5.双荧光素酶报告基因检测可以定量分析启动子活性。（√）

6.林木干旱胁迫时，所有基因表达都会下调。（×）

7.酵母细胞转化效率只与转化方法有关。（×）

8.克隆NAC基因必须知道其完整的DNA序列。（×）

9.荧光定量PCR能准确检测基因的绝对表达量。（×）

10.基因过表达可以明确基因在干旱胁迫中的功能。（√）

四、简答题（每题5分，共4题）

1.简述酵母单杂交原理。

答案：将诱饵DNA序列（如靶基因启动子片段）与报告基因上游调控序列融合构建诱饵载体，猎物蛋白（如NAC蛋白）与转录激活结构域融合构建猎物载体。若诱饵与猎物相互作用，可激活报告基因表