猪伪狂犬病病毒实验室诊断与防治.pptxVIP

项目二病毒病的实验室诊断任务4常见的动物病毒——DNA病毒伪狂犬病病毒

他率先确定了猪伪狂犬病在我国的爆发流行，提出了我国猪伪狂犬病的根除计划，成功研制了猪伪狂犬病油乳剂灭活疫苗、基因工程疫苗、乳胶凝集检测试剂盒、酶联免疫吸附试验诊断试剂盒等多种新型疫苗和诊断试剂盒，为我国猪伪狂犬病的防控做出了重大贡献，是“养殖户的守护神”。中国工程院院士、华中农业大学教授陈焕春情系百姓，守护动物健康

一、生物学特性该病毒属于疱疹病毒科，α-疱疹病毒亚科，猪疱疹病毒Ⅰ型，有囊膜，呈椭圆形或圆形，双股DNA病毒。有研究表明PRV的感染与病毒囊膜有直接的关系。伪狂犬病病毒（PRV)伪狂犬病毒的粒子形态

二、抵抗力伪狂犬病病毒对外界的抵抗力非常强，在8℃的条件下可以存活46d左右，在室温条件下可以依附在干草、树枝或者食物的表面存活10～30d。短期内保存伪狂犬病病毒时放在4℃要比冷冻条件下更好。猪伪狂犬病病毒也有自然的天敌，该病毒对乙醚、丙酮、氯仿等一些脂溶性溶剂和福尔马林、紫外线灯有较高的敏感性。在5%的石炭酸作用下，伪狂犬病病毒只能存活2min，此外，伪狂犬病病毒对于碱性溶液也非常敏感，0.5%～1%的氢氧化钠可以迅速杀灭PRV病毒。

三、传播方式伪狂犬病常见于猪、牛、绵羊、犬和猫，另外，多种野生动物、肉食动物也易感。猪是伪狂犬病病毒的贮存宿主和传染源，人对本病无易感性。猪场伪狂犬病病毒主要通过已感染猪排毒而传给健康猪，另外，被病毒污染的工作人员和器具在传播中起着重要的作用。此外，本病还可通过胎盘传给子代，所以对胎儿的感染是致命的；还可通过呼吸道黏膜、破损的皮肤和配种等发生感染。

三、传播方式生物安全水源人员流动物品传递空气病死猪处理废弃物处理猪只转运外来生物饲料后备种猪/精液针头切断传播途径，避免猪只感染

四、致病性猪、牛、羊、犬、猫、兔、鼠等多种动物都可自然感染本病，猪是伪狂犬病病毒的贮存宿主和传染。本病一年四季都可发生，但以冬春两季和产仔旺季多发，这是因为低温有利于病毒的存活。猪伪狂犬病：死胎

四、致病性怀孕母猪流产、产死胎、产木乃伊胎无论是头胎母猪还是经产母猪都发病，而且没有严格的季节性，但以寒冷季节即冬末春初多发。病猪后躯麻痹、站立不稳四肢抽搐、头颈后仰

四、致病性扁桃体化脓坏死性炎扁桃体出血和溃疡肝脏表面白色坏死结节（白挨泉等）脾脏表面白色坏死（白挨泉等）

五、微生物学诊断（一）病料采集：在病的急性期，用棉拭子在口咽部取样。病死的动物取扁桃体、颈淋巴结和鼻黏膜，收集局部水肿液和该区域的神经干。（二）细胞培养：猪肾传代细胞系，以及猪、兔和牛的原代肾细胞培养最适于病毒的分离培养。（三）动物接种：病料皮下接种家兔，能产生典型的瘙痒症状，2d后兔舔舐接种部位，以后啃咬皮肤。

五、微生物学诊断（四）血清学检查——ELISA法利用抗原-抗体特异性结合的原理进行抗原的检测，可用于大量样品的检测。此方法的类型很多，包括普通的ELISA法、双抗加心、斑点ELISA、竞争ELISA、鉴别诊断ELISA等，各种方法细节略有不同，但都操作简单，易于推广。经大量实验数据表明，病猪的脑组织、肺脏和扁桃体取样所检出伪狂犬病毒的检出率较高，且结果准确。

五、微生物学诊断（五）免疫荧光技术：利用荧光色素对待检抗原或抗体先进行免疫荧光标记，再进行抗原－抗体结合实验，进行荧光标记的示踪。目前，此方法被证实可直接用于检测病猪的脏器组织，其中，淋巴结和扁桃体的检出率最高。（六）PCR技术：此方法快速、高效、特异性强，需要一定的实验技术水平。目前，DNA提取试剂盒已经普遍，可以方便、快速地从病料组织中提取目的DNA，设计伪狂犬病毒的特异性保守序列引物，进行PCR扩增，用琼脂糖凝胶进行电泳鉴定。（七）DNA探针技术：以PCR技术作为基础，将伪狂犬病毒的一段保守片段进行克隆作为探针材料，进行目的基因的扩增。结果准确、灵敏度高，但此方法操作复杂，成本较高。

六、防治本病遍布全国，目前无特效的治疗方法，免疫预防是控制本病唯一有效的办法。我国猪场一般在新生仔猪出生1～3日龄内通过鼻内接种相关疫苗，70d后进行肌肉接种。对母猪和后备猪进行季度性接种，每年免疫3～4次。

六、防治PR的疫苗种类有很多，包括弱毒苗、灭活苗、基因工程疫苗、缺失苗、亚单位苗、多价苗等，不同苗的免疫效果存在显著区别。灭活苗安全性明显好于弱毒苗，不会引起机体排毒，使用安全，但其保护效力低于弱毒苗。病死猪要深埋，全场范围内要进行灭鼠和扑灭野生动物，禁止散养家禽和防止猫、犬进入该区。

重视生物安全，科学防控疫病

思考试分析伪狂犬病毒引起的伪狂犬病给猪场带来哪些危害？