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2025年大学《医学实验技术-分子与细胞实验操作实训》考试参考题库及答案解析
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一、选择题
1.在进行PCR实验时,以下哪项是正确的操作?()
A.将模板DNA直接加入反应体系中,无需处理
B.在反应体系中加入RNA酶以消除RNA污染
C.使用无DNA酶的蒸馏水配制反应体系
D.将反应体系在高温下预热5分钟
答案:C
解析:PCR实验对模板DNA的纯度要求较高,直接加入模板DNA可能导致污染或抑制PCR反应。RNA酶虽然可以消除RNA污染,但通常PCR实验更关注DNA模板的纯度。使用无DNA酶的蒸馏水可以避免外源DNA污染,保证实验结果的准确性。高温预热可以变性模板,但并非所有PCR反应都需要预热,具体操作需根据实验设计而定。
2.以下哪种方法常用于DNA的提取和纯化?()
A.超速离心
B.氯仿-异戊醇抽提
C.电泳分离
D.薄层色谱
答案:B
解析:氯仿-异戊醇抽提是常用的DNA提取和纯化方法,通过有机溶剂去除蛋白质等杂质,从而获得较纯的DNA。超速离心主要用于分离细胞器或大分子复合物;电泳分离用于分离核酸或蛋白质;薄层色谱用于小分子物质的分离和鉴定。
3.在进行蛋白质印迹实验时,以下哪项是正确的步骤?()
A.将蛋白质样品直接电泳分离后转移到NC膜上
B.在电泳前对蛋白质样品进行还原处理
C.使用预染Marker进行电泳时无需预电泳
D.将蛋白质转移到PVDF膜上时使用高盐缓冲液
答案:B
解析:蛋白质印迹实验中,电泳前对蛋白质样品进行还原处理可以打断二硫键,使蛋白质条带清晰。直接电泳后转移可能导致条带模糊;预电泳可以提高转移效率;PVDF膜转移时使用低盐缓冲液以避免膜溶解。
4.以下哪种试剂常用于核酸凝胶电泳的染色?()
A.碱性品红
B.溴化乙锭
C.萨氏染色剂
D.亚甲基蓝
答案:B
解析:溴化乙锭(EB)是常用的核酸凝胶电泳染色剂,可以嵌入DNA和RNA链中,在紫外光下发出荧光,便于观察核酸条带。碱性品红和亚甲基蓝主要用于蛋白质染色;萨氏染色剂是组织学染色剂。
5.在进行细胞培养时,以下哪项是正确的操作?()
A.使用无菌水直接清洗细胞培养瓶
B.在超净工作台中操作时无需佩戴口罩
C.细胞培养基中添加10%的胎牛血清
D.将细胞置于37℃、5%CO2的厌氧环境中培养
答案:C
解析:细胞培养时,应使用无菌生理盐水或PBS清洗细胞培养瓶;超净工作台中操作必须佩戴口罩以防止污染;细胞培养基通常添加10%的胎牛血清提供生长因子和维持培养环境;细胞培养通常置于37℃、5%CO2的常氧环境中。
6.以下哪种方法常用于基因克隆?()
A.限制性酶切和连接
B.PCR扩增
C.电泳分离
D.薄层色谱
答案:A
解析:基因克隆通常通过限制性酶切和连接技术将目标基因插入载体中,从而实现基因的扩增和表达。PCR主要用于基因扩增;电泳和薄层色谱用于分离和分析。
7.在进行流式细胞术分析时,以下哪项是正确的操作?()
A.直接将新鲜血液样本上机分析
B.在细胞悬液中加入固定剂后再进行染色
C.使用抗凝血剂采集血液样本
D.将细胞置于4℃保存以增加分析时间
答案:C
解析:流式细胞术分析通常使用抗凝血剂采集血液样本,以防止血液凝固;上机前需对样本进行处理,如过滤去除细胞碎片;固定剂应在染色后加入;细胞样本应新鲜采集并立即分析。
8.以下哪种方法常用于蛋白质的纯化?()
A.离子交换层析
B.凝胶过滤层析
C.亲和层析
D.超速离心
答案:C
解析:亲和层析是常用的蛋白质纯化方法,利用蛋白质与特定配体的特异性结合进行纯化。离子交换层析和凝胶过滤层析也常用于蛋白质纯化,但亲和层析具有更高的特异性。超速离心主要用于分离细胞器或大分子复合物。
9.在进行细胞计数时,以下哪种方法最常用?()
A.显微镜直接计数
B.血细胞计数板法
C.流式细胞术
D.酶联免疫吸附测定
答案:B
解析:血细胞计数板法是最常用的细胞计数方法,通过显微镜观察计数板上的细胞数量,操作简单且成本低。显微镜直接计数适用于少量样本;流式细胞术适用于大规模细胞分析;酶联免疫吸附测定主要用于检测抗体或抗原。
10.以下哪种试剂常用于蛋白质的酶联免疫吸附测定?()
A.乙酰化试剂
B.过碘酸钠
C.辣根过氧化物酶
D.蛋白质A/G磁珠
答案:C
解析:辣根过氧化物酶(HRP)是常用的酶联免疫吸附测定(ELISA)标记酶,通过与抗体结合后发光检测蛋白质。乙酰化试剂和过碘酸钠用于蛋白质修饰;蛋白质A/G磁珠用于蛋白质纯化。
11.在进行琼脂糖凝胶电泳时,以下哪种措施可以提高DNA条带的
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