DB21-T 3180-2019 羊肚菌菌种生产技术规程.docxVIP

DB21T羊肚菌菌种生产技术规程

1范围

本标准规定了羊肚菌（Morchellaspp.）菌种生产的术语和定义、生产场地要求、生产设备与器具、原种制备、栽培种制备、菌种质量要求、检验方法、包装、标签、运输和贮存等技术要求。

本标准适用于羊肚菌母种、原种和栽培种的生产。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB5749生活饮用水卫生标准

GB15981消毒与灭菌效果的评价方法与标准

NY/T528食用菌菌种生产技术规程

NY/T1742食用菌菌种通用技术要求

3术语和定义

下列术语和定义适用于本标准。

3.1羊肚菌Morchellaspp.

3.2母种stockculture

从羊肚菌子实体、菌核或孢子分离纯化获得，或经鉴定确认的优良菌株，用于扩大繁殖的原始菌种。

3.3原种mother

5生产设备与器具

5.1基本设备

5.1.2接种设备：应配备超净工作台或生物安全柜，洁净度达到100级，提供无菌操作环境。

5.1.3培养设备：应配备恒温培养箱，温度控制范围15℃30℃，精度±1℃；湿度控制范围50%90%，精度±5%。

5.1.4搅拌设备：应配备电动搅拌器或磁力搅拌器，用于培养基的均匀混合。

5.1.5称量设备：应配备电子天平，精度不低于0.01g，用于培养基成分的精确称量。

5.2培养容器

5.2.1试管：应选用规格为18mm×180mm或20mm×200mm的硬质玻璃试管，管口应平整无破损。

5.2.2培养皿：应选用直径90mm或100mm的一次性无菌塑料培养皿或可重复使用的玻璃培养皿。

5.2.3菌种瓶：应选用容积500mL1000mL的耐高温塑料瓶或玻璃瓶，瓶口应配有透气膜或棉塞。

5.3其他器具

5.3.1接种工具：应配备接种针、接种环、解剖刀、镊子等不锈钢工具，使用前需灭菌处理。

5.3.2量具：应配备量筒、量杯、移液管等，用于培养基液体的精确量取。

5.3.3清洗器具：应配备毛刷、清洗槽等，用于培养容器和器具的清洗。

5.3.4消毒器具：应配备紫外线灯、消毒喷雾器等，用于环境消毒。

6原种制备

6.1培养基配方

6.1.1PDA培养基：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂15g20g，蒸馏水1000mL，pH自然。

6.1.2麦芽浸膏培养基：麦芽浸膏20g，葡萄糖20g，琼脂15g20g，蒸馏水1000mL，pH自然。

6.1.3综合培养基：马铃薯200g，葡萄糖20g，蛋白胨5g，酵母浸膏2g，磷酸二氢钾1g，硫酸镁0.5g，琼脂15g20g，蒸馏水1000mL，pH自然。

6.2培养基制备

6.2.1马铃薯培养基制备：将马铃薯洗净去皮，称取200g切成小块，加入1000mL蒸馏水煮沸30min，用纱布过滤，取滤液补足至1000mL。

6.2.2加入琼脂：在滤液中加入琼脂，加热至完全溶解。

6.2.3加入其他成分：待琼脂完全溶解后，依次加入葡萄糖、蛋白胨等其他成分，搅拌至完全溶解。

6.2.4调节pH：使用pH计或精密pH试纸测定培养基pH值，必要时用0.1mol/LNaOH或0.1

7栽培种制备

7.1培养基配方

7.1.1木屑培养基：阔叶树木屑78%，麦麸20%，石膏1%，蔗糖1%，含水量60%65%。

7.1.2棉籽壳培养基：棉籽壳80%，麦麸18%，石膏1%，蔗糖1%，含水量60%65%。

7.1.3混合培养基：阔叶树木屑40%，棉籽壳40%，麦麸18%，石膏1%，蔗糖1%，含水量60%65%。

7.2培养基制备

7.2.1原料处理：木屑应过筛，去除过大颗粒和杂质；棉籽壳应提前预湿，使其充分吸水。

7.2.2配料：按照配方比例准确称量各组分，干料混合均匀后，加入适量水调节含水量。

7.3接种与培养

7.3.3翻堆：培养期间每隔7d10d翻堆一次，促进菌丝均匀生长，防止局部过热。

7.3.4质量检查：培养期间定期观察菌丝生长情况，检查是否有污染，菌丝应呈白色，生长旺盛，无杂菌污染。

8菌种质量要求

8.1感官指标

8.1.1母种：菌丝呈白色至淡黄色，生长均匀，无杂菌污染，无异味。

8.1.2原种：菌丝呈白色，生长旺盛，完全覆盖培养基表面，无杂菌污染，无异味。

8.1.3栽培种：菌丝呈白色，生长旺盛，完全穿透培养基，无杂菌污染，无异味。

8.2生理指标

8.2.1生长速度：在适宜条件下，母种菌丝生长速度不低于3mm/d；原种和栽培种菌丝应在规定时间内完全覆盖培养基。

8.2.2菌丝活力：菌丝应具有较强的生长势，接种后能迅