DB22-T 1670-2012 人参中木质素含量的测定 分光光度法.docxVIP

DB22T人参中木质素含量的测定分光光度法

本标准规定了采用分光光度法测定人参中木质素含量的方法原理、试剂与材料、仪器设备、分析步骤、结果计算及精密度要求。木质素作为人参细胞壁的重要组成成分，其含量直接影响人参的品质和药用价值。本方法基于木质素在酸性条件下与特定显色剂反应有色化合物的特性，通过分光光度计在特定波长下测定吸光度，从而计算出人参样品中木质素的含量。该方法适用于鲜人参、干人参及其加工制品中木质素含量的定量分析，为人参质量评价提供了科学依据。

1范围

本标准规定了人参中木质素含量的分光光度测定方法。本标准适用于鲜人参、干人参及其加工制品中木质素含量的测定。本方法的检出限为0.05mg/g，定量限为0.15mg/g。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T8170数值修约规则与极限数值的表示和判定

GB/T5009.3食品中水分的测定

3原理

人参样品经粉碎、脱脂处理后，在酸性条件下，木质素中的酚羟基与香草醛反应有色化合物，该化合物在280nm波长处有最大吸收。在一定浓度范围内，吸光度与木质素含量呈线性关系，通过测定吸光度值，计算样品中木质素的含量。

4试剂与材料

除非另有说明，本标准所用试剂均为分析纯，水应符合GB/T6682中三级水的规定。

4.1无水乙醇

4.2丙酮

4.3浓硫酸：ρ=1.84g/mL

4.4香草醛：纯度≥99%

4.5木质素标准品：纯度≥95%

4.6香草醛溶液：称取1.0g香草醛，用100mL浓硫酸溶解，现用现配。

4.7木质素标准储备液：精确称取10.0mg木质素标准品，用无水乙醇溶解并定容至100mL，浓度为100μg/mL。

4.8木质素标准工作液：分别吸取木质素标准储备液0.5mL、1.0mL、2.0mL、4.0mL、6.0mL、8.0mL于10mL容量瓶中，用无水乙醇定容至刻度，配制成浓度为5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、40μg/mL、60μg/mL、80μg/mL的标准系列溶液。

5仪器设备

5.1分光光度计：波长范围1901100nm，配有1cm石英比色皿

5.2分析天平：感量0.1mg

5.3超声波清洗器：频率40kHz，功率250W

5.4离心机：转速≥4000r/min

5.5恒温水浴锅：控温精度±1℃

5.6组织捣碎机

5.7旋转蒸发仪

5.8真空干燥箱

5.9标准筛：孔径0.5mm

6分析步骤

6.1样品制备

取适量人参样品，用蒸馏水洗净表面杂质，吸干水分后切成小块，于60℃真空干燥箱中干燥至恒重。将干燥样品粉碎，过0.5mm标准筛，备用。

6.2脱脂处理

精确称取1.000g（精确至0.001g）样品粉末，置于100mL具塞锥形瓶中，加入30mL丙酮乙醇混合液（1:1，v/v），超声波提取30min，离心分离（4000r/min，10min），弃去上清液。重复上述操作两次，将残渣于60℃真空干燥箱中干燥至恒重，得到脱脂样品。

6.3木质素提取

将脱脂样品转移至50mL具塞锥形瓶中，加入20mL蒸馏水，置于80℃恒温水浴锅中加热回流2h，冷却至室温后离心分离（4000r/min，10min），弃去上清液。残渣用10mL蒸馏水洗涤两次，合并洗涤液，定容至25mL，作为待测液。

6.4显色反应

精确吸取2.0mL待测液于10mL具塞比色管中，加入5.0mL香草醛溶液，混匀后置于30℃恒温水浴锅中反应30min，取出冷却至室温。

6.5测定

以试剂空白为参比，用1cm石英比色皿在280nm波长处测定吸光度值。同时测定木质素标准系列溶液的吸光度，绘制标准曲线。

7结果计算

7.1标准曲线绘制

以木质素标准系列溶液的浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程和相关系数。相关系数应不小于0.999。

7.2样品中木质素含量计算

样品中木质素含量按式（1）计算：

X=(C×V×D)/(m×1000)（1）

式中：

X——样品中木质素的含量，单位为毫克每克（mg/g）；

C——从标准曲线上查得的待测液中木质素的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）；

V——待测液定容体积，单位为毫升（mL）；

D——稀释倍数；

m——样品质量，单位为克（g）。

计算结果保留两位有效数字，数值修约按GB/T8170的规定执行。

8精密度

在重复