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项目四子项目高效液相色谱分析法
问题一什么是高效液相色谱法?问题1.1什么是高效液相色谱法?问题1.2高效液相色谱法如何实现组分的高效分离?
第一节概述问题1.1什么是高效液相色谱法?一、高效液相色谱法固定相颗粒大小采用颗粒极细、规则均匀的固定相,传质阻力小,分离效率高。固定相颗粒直径很小流动相输送压力样品分离速度检测器灵敏度
问题1.2高效液相色谱法如何实现组分的高效分离?一、高效液相色谱法采用颗粒极细、规则均匀的固定相,传质阻力小,分离效率高。第一节概述二、高效液相色谱分离理论可忽略影响高效液相色谱峰扩张的主要因素:A和Cu项a.采用合适的流动相,控制相对较小的流动相流速;b.采用颗粒直径极小的固定相;c.色谱柱填充均匀;d.减小固定相液膜厚度;
问题二高效液相色谱法利用什么设备实现分离?问题1.1高效液相色谱仪由哪几部分组成?问题1.2高效液相色谱仪各部分的功能如何?
第二节高效液相色谱仪问题2.1高效液相色谱仪由哪几部分组成?一、高效液相色谱仪流程馏分收集器高压输液系统梯度洗脱装置辅助系统流动相输送系统进样系统分离系统检测系统储液器高压泵进样器色谱柱检测器进样器色谱柱检测器数据处理系统数据处理系统
第二节高效液相色谱仪二、高压输液系统为色谱分离提供流速恒定的流动相。密封;流量恒定;压力平稳、可调;易于更换溶剂。常用高压输液泵恒压泵恒流泵问题2.2高效液相色谱仪各部分的功能如何?一、高效液相色谱仪流程高压输液系统进样器色谱柱检测器数据处理系统储液器高压泵混合器过滤器
第二节高效液相色谱仪二、高压输液系统为色谱分离提供流速恒定的流动相。问题2.2高效液相色谱仪各部分的功能如何?一、高效液相色谱仪流程高压输液系统进样器色谱柱检测器数据处理系统三、进样器(系统)高压进样阀定量引入样品。死体积小柱外效应隔膜注射进样器高压进样阀。
第二节高效液相色谱仪二、高压输液系统为色谱分离提供流速恒定的流动相。问题2.2高效液相色谱仪各部分的功能如何?一、高效液相色谱仪流程高压输液系统进样器色谱柱检测器数据处理系统三、进样器(系统)色谱柱实现样品组分高效分离。柱管+固定相柱管尺寸内径:4-5mm长度:10-50cm填料直径5-10?m塔板数7000-10000色谱柱填装好坏是影响柱效的重要因素定量引入样品四、分离系统-色谱柱
第二节高效液相色谱仪二、高压输液系统为色谱分离提供流速恒定的流动相。问题2.2高效液相色谱仪各部分的功能如何?一、高效液相色谱仪流程高压输液系统进样器色谱柱检测器数据处理系统三、进样器(系统)检测器实现样品组分高效分离定量引入样品四、分离系统-色谱柱五、检测器(系统)将样品组分的量定量转化为电信号并放大、输出。灵敏、噪音小、响应快、线性范围宽、死体积小溶质型、总体型常用检测器紫外-可见检测器(UVD);荧光检测器(FLD);折光检测器(RID);蒸发光散射检测器(ELSD)。电化学检测器(ED);
第二节高效液相色谱仪二、高压输液系统为色谱分离提供流速恒定的流动相。问题2.2高效液相色谱仪各部分的功能如何?一、高效液相色谱仪流程高压输液系统进样器色谱柱检测器数据处理系统三、进样器(系统)实现样品组分高效分离定量引入样品四、分离系统-色谱柱五、检测器(系统)将样品组分的量定量转化为电信号并放大、输出。六、附属系统脱气装置梯度洗脱(淋洗)装置恒温设备自动进样器馏分收集器在分离过程中,使流动相组成随时间改变而改变。梯度洗脱通过不断改变色谱柱中流动相的极性、离子强度、pH等因素,使被测组分的相对保留值得以改变,提高分离效率。当样品组成复杂,组分性质差别较大,组分在流动相和固定相中的分配系数差别很大时使用
第二节高效液相色谱仪二、高压输液系统问题2.2高效液相色谱仪各部分的功能如何?一、高效液相色谱仪流程三、进样器(系统)四、分离系统-色谱柱五、检测器(系统)六、附属系统七、常用检测器1.紫外-可见检测器和光电二极管阵列检测器可调波长紫外-可见检测器固定波长紫外-可见检测器溶质型
第二节高效液相色谱仪二、高压输液系统问题2.2高效液相色谱仪各部分的功能如何?一、高效液相色谱仪流程三、进样器(系统)四、分离系统-色谱柱五、检测器(系统)六、附属系统七、常用检测器1.紫外-可见检测器和光电二极管阵列检测器溶质型光电二极管阵列检测器(PAD)灵敏度高;线形范围宽;对流动相和温度变化不敏感。可用于梯度洗脱只能用于有紫外-可见吸收的样品组分的检测
第二节高效液相色谱仪二、高压输液系统问题2.2高效液相色谱仪各部分的功能如何?一、高效液相色谱仪流程三、进样器(系统)四、分离系统-色谱柱五、检测器(系统)六、附属系统七、常用检测器1
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