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—９４—江苏农业科学２０２５年第５３卷第４期

武博寒，李鹏志，蒋红娟，等．普通烟草ＮｔＡＲＦ２基因克隆及表达模式分析［Ｊ］．江苏农业科学，２０２５，５３（４）：９４－９９．

ｄｏｉ：１０．１５８８９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－１３０２．２０２５．０４．０１１

普通烟草ＮｔＡＲＦ２基因克隆及表达模式分析

１２２２２３２１１１

武博寒，李鹏志，蒋红娟，刘涛，贺帅，孟岩，喻奇伟，湛佳伟，温海洋，贾宏窻

（１．河南农业大学烟草学院，河南郑州４５０００２；２．贵州省烟草公司毕节市公司，贵州毕节５５１７００；

３．史丹利化肥宁陵有限公司，河南商丘４７６０００）

摘要：为探究生长素响应因子ＮｔＡＲＦ２基因在调控烟草钾的吸收和利用过程中的功能，将烟草Ｋ３２６ＮｔＡＲＦ２的

ｃＤＮＡ作为模板通过ＰＣＲ反应进行克隆，利用生物信息学软件分析其结构和功能，通过亚细胞定位技术判断其表达位

置，运用ｑＲＴ－ＰＣＲ等技术对ＮｔＡＲＦ２基因的表达模式进行研究。结果表明，ＮｔＡＲＦ２基因全长２５５６ｂｐ，可编码８５１个

氨基酸；ＮｔＡＲＦ２蛋白相对分子质量为９４．５２８０５ｋｕ；理论等电点为６．３７，酸性；不稳定指数为５５．１１，属于不稳定蛋白，

并且不包含跨膜结构域；同源性和进化树分析表明，烟草ＮｔＡＲＦ２与拟南芥ＡｔＡＲＦ２同源性和亲缘性较高。亚细胞定

位结果表明该蛋白是一个核蛋白；启动子分析和不同胁迫（低钾、高温、干旱、低温、高盐）处理下的ｑＲＴ－ＰＣＲ结果显

示，ＮｔＡＲＦ２基因能够响应低钾、高温、干旱和盐胁迫反应，尤其是低钾响应；进一步研究发现该基因具有组织表达特异

性，且低钾条件下烟株根、茎和叶片部位该基因表达量显著降低，推测其参与了不同胁迫下钾离子的吸收和再利用，且

可能是一个负调控因子。

关键词：普通烟草；ＮｔＡＲＦ２基因；基因克隆；表达模式；低钾胁迫

中图分类号：Ｓ１８８；Ｓ５７２．０１文献标志码：Ａ文章编号：１００２－１３０２（２０２５）０４－００９４－０６

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烟叶中的钾含量是影响烟叶品质的关键因素与生长素的信号传递路径。目前，对植物中的

之一，高含量的钾不仅可以增强烟叶的燃烧性和减ＡＲＦ基因家族的研究主要聚焦于拟南芥、水稻和番

少焦油的产量，对提高香气质和香气量有很大帮茄等作物，分别鉴定出２３、２５、２１个，其中大部分成

助，并且有利于提高烟叶外观和内在品质［１］。在我员的功能都与植物根、叶、花、果、种子的生长发育

国，大多数烟草产区的烟叶钾含量仅为１．５％，这一有关。如克鲁夫等发现拟南芥ＡｔＡＲＦ２参与调控拟

数值远远低于优质烟叶钾含量（２％），因此，提高烟南芥种子和花大小；王德凯等发现在ＡＲＦ７／１９通过

叶钾含量是我国烟草行业发展亟需解决的问题。激活ＬＢＤ／ＡＳＬ基因的表达调控侧根发育，且两者之

植物在受到低钾胁迫时会诱导相关基因和蛋白表间存在功能冗余；刘松瑜等发现番茄ＳＩＡＲＦ１２基因

达，例如钾调控转录因子（ＷＲＫＹ、ＧＲＡＳ等）、钾转负调控番茄果实膨大；水稻ＯＳＡＲＦ１基因在调控植

运蛋白（ＨＡＫ、ＫＵＰ等），增强植物对钾离子的吸收株的生长速率、叶片大小和植株矮化程度上起到了

与利用［２－６］。同时也有研究表明，植物通过调控激关键作用［１０－１６］。同时存在少部分成员参与植物逆

素信号，改变根系构型，增加主根长度和侧根数量，境胁迫响应，如Ｂｏｕｚｒｏｕｄ等发现通过运用ＣＲＩＳＰＲ／

增加根系活力，以便从土壤中吸收更多的钾元Ｃａｓ技术下调或丧失番茄ＳＩＡＲＦ４基因均能提高番

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