以紧密连接为例说明基础生物学研究流程.pdfVIP

以紧密连接为例说明基础生物学研究流程.pdf

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2.Usetightjunctionasanexampletoillustratethebasicprocedurein

basicbiologicalresearch.

1)ExperimentatTissueLevel(frogskin)

2)Result:Nodiffusionofsubstancesweenchamber1and

chamber2

3)ProposeaHypothesis:Istheparacellularpathwaysealed?

4)ExperimentatEMLevel:

Small,Electron-DenseTracerMoleculeAddedtotheApicalSide

orBasolateralSide

5)Result:Sealed!

6)Howisitsealed?

7)LookfortheResponsiblestructure

SEMTEM

↓↓

A‘Belt’onthesurfaceattheVeryApicalEnd

8)TightJunctionwasfound

Higherpower→‘SeveralLayers’

FreezeFracture

8.1)StudyTightJunctionatmolecularlevel

Anti-OccludinAb-goldandAnti-ClaudinAb-gold

8.2)FormaModel

9)Structure→StructuralModel

2.以紧密连接为例,说明基础生物学研究的基本流程。

1)组织水平实验(青蛙皮肤)

2)结果:腔室1和腔室2之间没有物质扩散3)提出假设:细胞旁通

路是否封闭?4)EM水平实验:将小的电子致密示踪分子添加到顶

端侧或基底外侧5)结果:密封!6)如何密封?7)Lookforthe

Responsiblestructure

扫描电镜透射电镜

表面有一条“带”t最顶端

8)发现紧密连接

更高功率→“多层”冷冻断裂8.1)在分子水平

研究紧密连接Anti‑OccludinAb‑gold和

Anti‑ClaudinAb‑gold

8.2)建立模型

9)结构→结构模型

10)UsethestructuralmodeltoexinitsFunction

Structure→Function

‘Step-by-step’Sealingoffofpara-cellularSpace

11)Relatethebasicresearchwithclinicalobservation

Biology→

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