以紧密连接为例说明基础生物学研究流程.pdfVIP

2.Usetightjunctionasanexampletoillustratethebasicprocedurein

basicbiologicalresearch.

1)ExperimentatTissueLevel(frogskin)

2)Result:Nodiffusionofsubstancesweenchamber1and

chamber2

3)ProposeaHypothesis:Istheparacellularpathwaysealed?

4)ExperimentatEMLevel:

Small,Electron-DenseTracerMoleculeAddedtotheApicalSide

orBasolateralSide

5)Result:Sealed!

6)Howisitsealed?

7）LookfortheResponsiblestructure

SEMTEM

↓↓

A‘Belt’onthesurfaceattheVeryApicalEnd

8)TightJunctionwasfound

Higherpower→‘SeveralLayers’

FreezeFracture

8.1)StudyTightJunctionatmolecularlevel

Anti-OccludinAb-goldandAnti-ClaudinAb-gold

8.2)FormaModel

9)Structure→StructuralModel

2.以紧密连接为例，说明基础生物学研究的基本流程。

1）组织水平实验（青蛙皮肤）

2)结果：腔室1和腔室2之间没有物质扩散3)提出假设：细胞旁通

路是否封闭？4)EM水平实验：将小的电子致密示踪分子添加到顶

端侧或基底外侧5)结果：密封！6）如何密封？7)Lookforthe

Responsiblestructure

↓

扫描电镜透射电镜

↓

表面有一条“带”t最顶端

8)发现紧密连接

更高功率→“多层”冷冻断裂8.1)在分子水平

研究紧密连接Anti‑OccludinAb‑gold和

Anti‑ClaudinAb‑gold

8.2）建立模型

9)结构→结构模型

10)UsethestructuralmodeltoexinitsFunction

Structure→Function

‘Step-by-step’Sealingoffofpara-cellularSpace

11)Relatethebasicresearchwithclinicalobservation

Biology→