T_ZNZ 251-2024 淡水鱼及其养殖水体中嗜水气单胞菌的分离和药敏试验方法.docxVIP

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T/ZNZ

浙江省农产品质量安全学会团体标准T/ZNZ251—2024

淡水鱼及其养殖水体中嗜水气单胞菌的分

离和药敏试验方法

AntimicrobialsusceptibilitytestingforAeromonashydrophila

isolatedfromfreshwaterfishandaquaculturewater

2024-04-01发布2024-05-01实施

浙江省农产品质量安全学会发布

I

T/ZNZ251—2024

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由浙江省农产品质量安全学会提出并归口。

本文件起草单位：浙江省农业科学院农产品质量安全与营养研究所、浙江省淡水水产研究所、湘湖实验室（农业浙江省实验室）、温州科技职业学院。

本文件主要起草人：马剑钢、林锋、唐标、杨华、龙晓倩、吴静、郝贵杰、黄爱霞、周冬仁、王雨辰、韩青松。

T/ZNZ251—2024

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淡水鱼及其养殖水体中嗜水气单胞菌的分离和药敏试验方法

1范围

本文件规定了淡水鱼及其养殖水体中嗜水气单胞菌(Aeromonashydrophila）的分离和药敏试验方法相关的术语和定义、设备、试剂和材料、试验程序、样品、分离培养、菌株确证、药敏试验及生物安全的要求。

本文件适用于淡水鱼及其养殖水体中嗜水气单胞菌的分离和药敏试验。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB4789.1食品安全国家标准食品微生物学检验总则

GB4789.28食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求

GB/T18652致病性嗜水气单胞菌检验方法

GB19489实验室生物安全通用要求

GB/T28642饲料中沙门氏菌的快速检测方法聚合酶链式反应（PCR）法

WS/T639抗菌药物敏感性试验的技术要求

T/ZNZ044畜禽养殖环节细菌耐药性监测方法

中华人民共和国农业农村部令第16号动物病原微生物菌（毒）种保藏管理办法

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

药敏试验antimicrobialsusceptibilitytesting

在体外测定微生物对抗菌药物敏感性的试验。

3.2

最低抑菌浓度minimalinhibitoryconcentration,MIC

采用肉汤稀释法等对微生物进行药物敏感性检测试验，能抑制肉眼可见的细菌生长的最低抗菌药物浓度。

3.3

折点breakpoint

T/ZNZ251—2024

2

用于区分菌株为敏感、中介和耐药的MIC值。

4设备

4.1超净工作台。

4.2基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）。

4.3核酸电泳仪。

4.4凝胶成像系统。

4.5聚合酶链式反应（PolymeraseChainReaction，PCR）扩增仪。

4.6微量移液器：0.1μL～2.5μL、1μL～10μL、10μL～100μL、100μL～1000μL。

4.7自动加样仪或多通道微量加样器：10μL～100μL。

4.8电子天平：感量0.001g。

4.9麦氏比浊仪：可测量范围0.01～4.00麦氏单位。

4.10恒温培养箱：28℃±1℃,35℃±1℃。

4.11低温运输箱：2℃~8℃。

4.12冰箱：2℃~8℃,-20℃,-80℃。

5试剂和材料

5.1试剂

5.1.1生理盐水：制备按附录A中A.1执行。

5.1.2氨苄青霉素：纯度大于98%。

5.1.3氨苄青霉素储液：按附录A中A.2执行。

5.2培养基

5.2.1氨苄青霉素麦康凯琼脂平板（McConkeyAgar）的制备按附录A中A.3执行。

5.2.2RS琼脂平板（Rimler-ShottsAgar）的制备按附录A中A.4执行。

5.2.3普通营养琼脂平