miR-155及miR-146a：胚胎着床过程中的表达规律与功能解码.docxVIP

miR-155及miR-146a：胚胎着床过程中的表达规律与功能解码

一、引言

1.1研究背景与意义

胚胎着床是胎生哺乳类动物的胚泡和母体子宫壁结合，从而建立母子间结构上的联系以实现物质交换的过程，是胚胎发育早期阶段的一个重要环节，其成功与否直接决定了妊娠的成败。在着床之前，胚泡在宫腔内游离，有遭排斥脱落危险；经过附着、穿入内膜之后，则母子两方面紧密结合，因而更有利于胚胎的生长发育。着床过程受到多种因素的精细调控，包括内分泌、免疫、细胞因子以及基因表达调控等，其中微小核糖核酸（microRNA，miRNA）作为一类重要的基因表达调控分子，在胚胎着床过程中的作用日益受到关注。

miRNA是一类内生的、长度约为21-23个核苷酸的非编码单链RNA分子，其通过与靶mRNA的互补配对结合，在转录后水平上对基因表达进行负调控，从而参与细胞的增殖、分化、凋亡等多种生物学过程。近年来，越来越多的研究表明，miRNA在胚胎着床过程中发挥着关键作用，它们可以调节子宫内膜的容受性、胚胎的黏附与侵入以及母胎界面的免疫调节等多个环节。例如，一些miRNA可以通过调控子宫内膜细胞的增殖、分化和分泌功能，影响子宫内膜的容受性，为胚胎着床创造适宜的微环境；另一些miRNA则可以调节胚胎细胞的黏附分子表达，促进胚胎与子宫内膜的黏附与侵入；此外，miRNA还可以通过调节母胎界面的免疫细胞功能和细胞因子分泌，维持母胎界面的免疫平衡，保障胚胎的正常着床和发育。

miR-155和miR-146a是近年来研究较为广泛的两种miRNA，它们在免疫系统、炎症反应以及肿瘤发生发展等过程中都发挥着重要作用。已有研究表明，miR-155和miR-146a在子宫内膜和胚胎中均有表达，并且它们的表达水平在胚胎着床过程中发生动态变化，提示它们可能参与了胚胎着床的调控。然而，目前关于miR-155和miR-146a在胚胎着床过程中的具体表达规律及其作用机制尚不完全清楚。深入研究miR-155和miR-146a在胚胎着床过程中的表达规律及其作用，不仅有助于揭示胚胎着床的分子调控机制，为不孕症的诊断和治疗提供新的理论依据和潜在靶点；同时，也有助于提高辅助生殖技术的成功率，具有重要的理论意义和临床应用价值。

1.2国内外研究现状

在国外，科研人员运用先进的基因编辑技术与单细胞测序技术，对miR-155和miR-146a在胚胎着床中的作用开展研究。通过构建基因敲除小鼠模型，发现敲除miR-155基因后，小鼠子宫内膜容受性相关基因的表达出现异常，胚胎着床率显著降低，这表明miR-155对维持子宫内膜正常功能、促进胚胎着床具有重要意义。运用单细胞测序技术分析着床期子宫内膜细胞，研究发现miR-146a在特定细胞亚群中的表达变化与胚胎黏附过程紧密相关，进一步深入研究揭示出其通过调控相关信号通路影响胚胎黏附分子的表达。

国内的研究则更侧重于从临床角度出发，结合辅助生殖技术进行探索。通过收集体外受精-胚胎移植（IVF-ET）患者的子宫内膜样本，运用实时荧光定量PCR技术检测miR-155和miR-146a的表达水平，发现反复胚胎着床失败患者的子宫内膜中，miR-155和miR-146a的表达与正常着床患者存在显著差异，提示这两种miRNA可能作为评估胚胎着床潜力的生物标志物。部分研究团队还利用动物实验模拟临床常见的病理妊娠情况，如复发性流产，研究miR-155和miR-146a在其中的作用机制，发现它们可能通过调节母胎界面的免疫微环境来影响胚胎的着床与发育。

尽管国内外在该领域已取得一定成果，但当前研究仍存在不足与空白。现有研究多集中于单一miRNA对胚胎着床某一环节的影响，对于miR-155和miR-146a在胚胎着床过程中复杂的协同作用机制研究较少。此外，目前对于这两种miRNA在体内的精确调控网络以及它们与其他非编码RNA之间的相互作用关系尚不清楚，这在很大程度上限制了对胚胎着床分子机制的全面理解。同时，如何将基础研究成果有效转化为临床诊断和治疗手段，也是亟待解决的问题。

1.3研究内容与方法

本研究旨在系统探究miR-155及miR-146a在胚胎着床过程中的表达规律及其作用。具体内容包括：首先，运用实时荧光定量PCR技术，检测miR-155及miR-146a在临床收集的分泌中期子宫内膜与早孕蜕膜标本中的表达水平，分析其表达差异；接着，建立早孕小鼠模型，研究不同早孕天数小鼠子宫中miR-155及miR-146a的表达变化，以及孕D5天胚胎着床点与非着床点miR-155与miR146a的表达差异；最后，通过宫角注入miR