发酵工艺原理第六章.pptVIP

4，接种量接种量：是指移入的种子液体积和接种后培养液体积的比例。接种量的大小决定于生产菌种在发酵罐中生长繁殖的速度，采用较大的接种量可以缩短发酵罐中菌丝繁殖达到高峰的时间，使产物的形成提前到来，并可减少杂菌的生长机会。但接种量过大或者过小，均会影响发酵。过大会引起溶氧不足，影响产物合成；而且会过多移入代谢废物，也不经济；过小会延长培养时间，降低发酵罐的生产率。通常接种量，细菌1~5%，酵母菌5~10%，霉菌7~15%，有时20~25%*第30页，共51页，星期日，2025年，2月5日三、种子质量的控制措施种子质量的最终指标是考察其在发酵罐中所表现出来的生产能力。因此首先必须保证生产菌种的稳定性，其次是提供种子培养的适宜环境保证无杂菌侵入，以获得优良种子。菌种稳定性的检查无（杂菌）检查*第31页，共51页，星期日，2025年，2月5日四、种子质量标准1，细胞或菌体菌丝形态、菌丝浓度和培养液外观（色素、颗粒等）单细胞：菌体健壮、菌形一致、均匀整齐，有的还要求有一定的排列或形态；霉菌、放线菌：菌丝粗壮、对某些染料着色力强、生长旺盛、菌丝分枝情况和内含物情况好。*第32页，共51页，星期日，2025年，2月5日2，生化指标种子液的糖、氮、磷的含量和pH变化。*第33页，共51页，星期日，2025年，2月5日3，产物生成量在抗生素发酵中，产物生成量是考察种子质量的重要指标，因为种子液中产物生成量的多少间接反映种子的生产能力和成熟程度。*第34页，共51页，星期日，2025年，2月5日4，酶活力种子液中某种酶的活力，与目的产物的产量有一定的关联。*第35页，共51页，星期日，2025年，2月5日第三节实例一、谷氨酸发酵的菌种扩大培养斜面菌种→一级种子培养→二级种子培养→发酵罐1，斜面菌种的培养菌种的斜面培养必须有利于菌种生长而不产酸，并要求斜面菌种绝对纯，不得混有任何杂菌和噬菌体，培养条件应有利于菌种繁殖，培养基以多含有机氮而不含或少含糖为原则。(1)斜面培养基组成葡萄糖0.1％蛋白陈1.0％牛肉膏1.0％氯化钠0.5％琼脂2.0~2.5％PH7.0~7.2（传代和保藏斜面不加葡萄糖）(2)培养条件：33~34℃，培养18~24h*第36页，共51页，星期日，2025年，2月5日2，一级种子培养一级种子培养的目的在于大量繁殖活力强的菌体，培养基组成应以少含糖分，多含有机氮为主，培养条件从有利于长菌考虑。(1)培养基组成葡萄糖2.5％尿素0.5％硫酸镁0.04％磷酸氢二钾0.1％玉米浆2.5~3.5％(按质增减)硫酸亚铁、硫酸锰各2ppmpH7.0*第37页，共51页，星期日，2025年，2月5日(2)培养条件用1000mL三角瓶装入培养基200mI，灭菌后置于冲程7．6cm、频率96次／min的往复式摇床上振荡培养12h，培养温度33~34℃(3)一级种子质量要求种龄：12hpH值：6.4±0.1光密度：净增OD值0.5以上残糖：0.5％以下无菌检查：(-)噬菌体检查：(-)镜检：菌体生长均匀、粗壮，排列整齐革兰氏阳性反应。*第38页，共51页，星期日，2025年，2月5日发酵工艺原理第六章*第1页，共51页，星期日，2025年，2月5日定义种子扩大培养：是指将保存在砂土管、冷冻干燥管中处于休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后，在经过扁瓶或摇瓶及种子罐逐级放大培养而获得一定数量和质量的纯种过程。这些纯种培养物称为种子。*第2页，共51页，星期日，2025年，2月5日作为种子的准则菌种细胞的生长活力强，移种至发酵罐后能迅速生长，迟缓期短；生理形状稳定；菌体总量及浓度能满足大容量发酵罐的要求；无杂菌污染；保持稳定的生产能力。*第3页，共51页，星期日，2025年，2月5日本章讲述的内容第一节种子的制备过程第二节种子质量的控制第三节实例第四节菌种的保藏与复壮*第4页，共51页，星期日，2025年，2月5日第一节种子的制备过程种子制备的过程大致可分为：实验室种子制备阶段生产车间种子制备阶段*第5页，共51页，星期日，2025年，2月5日一、实验室种子的制备实验室种子的制备一般采用两种方式对于产孢子能力强的及孢子发芽、生长繁殖快的菌种可以采用固体培养基培养孢子，孢子可直接作为种子罐的种子，这样操作简便，不易污染杂菌。对于产孢子