动物细胞工程细胞融合与单克隆抗体.pptVIP

第1页，共22页，星期日，2025年，2月5日一、动物细胞融合细胞融合是正常的生命活动两个细胞正在融合受精作用第2页，共22页，星期日，2025年，2月5日动物细胞融合（也称细胞杂交）是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。杂交细胞融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。第3页，共22页，星期日，2025年，2月5日细胞A细胞B杂交细胞灭活的病毒物理法化学法仙台病毒疱疹病毒新城鸡瘟病毒电激聚乙二醇（PEG）第4页，共22页，星期日，2025年，2月5日病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞相互凝聚，细胞模上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。灭活病毒诱导细胞融合的原理第5页，共22页，星期日，2025年，2月5日灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但是并不破坏这些病原体的抗原结构。第6页，共22页，星期日，2025年，2月5日动物细胞融合第7页，共22页，星期日，2025年，2月5日细胞融合的应用已成为研究细胞遗传，细胞免疫，肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。特别是利用细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术，为制造单克隆抗体开辟了新途径。第8页，共22页，星期日，2025年，2月5日二、单克隆抗体什么是抗体？抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。B淋巴细胞产生抗体。第9页，共22页，星期日，2025年，2月5日长期以来，人们为了获得抗体，采用的方法是向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体，然后，从动物的血清中分离所需抗体。缺点：产量低，纯度低，而且制备的抗体特异性差。第10页，共22页，星期日，2025年，2月5日B淋巴细胞与抗体１．B淋巴细胞受抗原刺激后，可以产生抗体。２．动物体内的B淋巴细胞可以产生百万种以上的抗体，每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。３．每一个淋巴细胞只能产生一种抗体。第11页，共22页，星期日，2025年，2月5日1仅用细胞培养技术可行吗？我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？有什么方法能使B细胞产生抗体的能力和肿瘤细胞无限增殖能力同时具备呢？第12页，共22页，星期日，2025年，2月5日如何大量生产单克隆抗体？利用淋巴细胞产生抗体的功能利用肿瘤细胞无限增殖的特性利用细胞融合的技术将两种细胞融合获得具有淋巴细胞和肿瘤细胞特性的杂交瘤细胞利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞第13页，共22页，星期日，2025年，2月5日单克隆抗体制备过程注射抗原B淋巴细胞骨髓瘤细胞细胞融合、筛选杂交瘤细胞细胞培养筛选，继续培养足够数量的、能产生特定抗体的细胞群体外培养注射到小鼠腹腔单克隆抗体第14页，共22页，星期日，2025年，2月5日两次筛选的目的第一次筛选是将未融合的B淋巴细胞，骨髓瘤细胞以及同类型融合的细胞通过选择培养基淘汰，筛选出B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合的细胞。第二次筛选是将产生特定抗体的杂交瘤细胞通过细胞培养用相应抗原检测的办法筛选出来。因为体内取免疫过的B淋巴细胞时取出很多种，形成的杂交瘤细胞很多种，所以需筛选出特定抗体的杂交瘤细胞。第15页，共22页，星期日，2025年，2月5日单克隆抗体由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。特点：特异性强、灵敏度高第16页，共22页，星期日，2025年，2月5日