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pcr核酸检测考试试题及答案

一、单项选择题（每题2分，共40分）

1.PCR技术中，引物的作用是（）

A.打开DNA双链

B.催化合成DNA子链

C.使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始延伸DNA链

D.提供模板

答案：C。引物是一小段单链DNA或RNA，它能与模板DNA特定区域互补配对，为DNA聚合酶提供起始位点，使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始延伸DNA链。A选项打开DNA双链是通过高温变性实现；B选项催化合成DNA子链的是DNA聚合酶；D选项模板是待扩增的DNA分子，并非引物。

2.下列关于TaqDNA聚合酶的说法，错误的是（）

A.是从嗜热细菌中分离提取的

B.具有热稳定性

C.催化合成DNA子链的方向是5′→3′

D.不需要引物就能起始合成DNA链

答案：D。TaqDNA聚合酶是从嗜热细菌中分离提取的，具有热稳定性，能在较高温度下保持活性，A、B正确；它催化合成DNA子链的方向是5′→3′，C正确；DNA聚合酶都需要引物才能起始合成DNA链，D错误。

3.PCR反应中，变性温度一般为（）

A.55℃左右

B.72℃左右

C.94℃左右

D.37℃左右

答案：C。PCR反应包括变性、退火、延伸三个步骤，变性是使双链DNA解旋为单链，需要较高温度，一般为94℃左右。55℃左右是退火温度，72℃左右是延伸温度，37℃是大多数酶在体外发挥活性的适宜温度，但不是PCR反应中的特征温度。

4.进行PCR核酸检测时，采集的咽拭子标本应保存于（）

A.无菌水

B.生理盐水

C.病毒保存液

D.酒精

答案：C。咽拭子标本采集后应保存于病毒保存液中，以保证病毒的活性和核酸的完整性，便于后续检测。无菌水和生理盐水不能有效保存病毒，酒精会使病毒蛋白变性，破坏核酸，不能用于标本保存。

5.以下哪种物质不是PCR反应体系的组成成分（）

A.dNTP

B.引物

C.核酸染料

D.TaqDNA聚合酶

答案：C。PCR反应体系的基本组成成分包括模板DNA、引物、dNTP（脱氧核苷三磷酸）、TaqDNA聚合酶和缓冲液等。核酸染料是用于电泳后对DNA进行染色观察的，不是PCR反应体系的组成成分。

6.在PCR扩增过程中，子链的合成是（）

A.连续进行的

B.先合成多个短片段，再连接成完整子链

C.随机进行的

D.从3′端向5′端进行

答案：A。在PCR扩增过程中，DNA聚合酶以模板链为指导，从引物的3′端开始，按照5′→3′的方向连续合成子链，而不是先合成多个短片段再连接，也不是随机进行的，合成方向也不是从3′端向5′端。

7.下列关于PCR核酸检测的灵敏度，说法正确的是（）

A.灵敏度较低，只能检测大量病毒

B.灵敏度高，能检测到极少量的病毒核酸

C.灵敏度与检测试剂无关

D.灵敏度与样本采集方法无关

答案：B。PCR核酸检测具有很高的灵敏度，能够检测到极少量的病毒核酸。其灵敏度与检测试剂的质量、引物的特异性等密切相关，同时样本采集方法是否规范也会影响检测的灵敏度，如果样本采集不当，可能导致病毒核酸含量过低而影响检测结果。

8.PCR反应中，退火的目的是（）

A.使引物与模板DNA结合

B.使DNA双链解旋

C.使DNA聚合酶发挥作用

D.使dNTP与模板DNA结合

答案：A。退火是将反应体系温度降低，使引物能够与模板DNA的特定区域互补配对结合，为后续DNA子链的合成做好准备。使DNA双链解旋是变性的目的；DNA聚合酶在延伸阶段发挥作用；dNTP是在DNA聚合酶的作用下与模板链上的碱基配对并连接到子链上，不是退火的目的。

9.进行PCR核酸检测时，实验室的生物安全防护级别一般为（）

A.一级

B.二级

C.三级

D.四级

答案：B。进行PCR核酸检测的实验室一般按照生物安全二级实验室的要求进行管理和防护。一级生物安全实验室适用于对健康成年人无致病作用的微生物；三级和四级生物安全实验室主要用于处理高致病性、致死性的病原微生物，一般PCR核酸检测针对的常见病毒不需要如此高的防护级别。

10.以下哪种样本不适用于PCR核酸检测（）

A.血液

B.尿液

C.粪便

D.头发

答案：D。血液、尿液和粪便中都可能含有病毒核酸，可以作为PCR核酸检测的样本。而头发中一般不含有病毒核酸，不适用于PCR核酸检测。

11.在实时荧光定量PCR中，Ct值与起始模板量的关系是（