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生物安全培训课件及试题及答案

一、生物安全法规与管理体系

生物安全是指防范现代生物技术开发应用中可能产生的负面影响，以及病原微生物、生物毒素等生物因子对人类健康、生态环境和社会稳定造成的威胁。我国高度重视生物安全，已构建“法律行政法规部门规章技术标准”四级法规体系，核心内容如下：

1.《中华人民共和国生物安全法》（2021年4月实施）

明确生物安全“风险预防、控制损害、分级管理、协同配合”四大原则。

规定病原微生物实验室实行“分级管理”（BSL1至BSL4）与“分类管理”（第一类至第四类病原微生物），其中第一类、第二类病原微生物为高致病性病原微生物，需在BSL3或BSL4实验室操作。

要求从事生物安全相关活动的单位建立“生物安全管理制度”，配备专职或兼职生物安全管理人员，定期开展培训与演练。

2.《病原微生物实验室生物安全管理条例》（国务院令第424号）

强调实验室设立单位需制定“实验室生物安全手册”，明确操作流程、应急处置等内容。

规定高致病性病原微生物实验活动需经省级以上卫生或兽医行政部门批准，实验结束后按要求销毁或送交保藏机构。

3.其他配套文件

《实验室生物安全通用要求》（GB194892008）：规定实验室设施、设备、人员资质等技术标准。

《医疗废物管理条例》：明确感染性废物（如培养物、被污染的实验耗材）、病理性废物（如实验动物尸体）等分类收集、转运与处置要求。

二、生物安全风险评估与控制

风险评估是生物安全管理的核心环节，通过系统识别、分析和控制风险，降低实验室感染与生物泄露事件发生概率。

（一）风险评估的基本流程

1.危害识别：明确实验涉及的生物因子（如细菌、病毒、细胞系）、操作类型（如离心、接种、动物实验）及可能的暴露途径（吸入、皮肤接触、锐器伤）。

示例：操作结核分枝杆菌（第二类病原微生物）时，需重点关注气溶胶暴露风险；操作HIV病毒（第二类）时，需防范锐器刺伤导致的血液传播。

2.风险分析：评估风险发生的可能性与后果严重性。

可能性分级：极低（几乎不发生）、低（偶发）、中（可能发生）、高（频繁发生）。

后果分级：可忽略（无健康影响）、轻度（短暂不适）、中度（需治疗）、重度（永久性损伤或死亡）。

3.风险控制：根据评估结果制定控制措施，优先采用“工程控制”（如生物安全柜、负压实验室），其次是“管理控制”（如标准操作程序、培训），最后是“个人防护”（如防护服、手套）。

（二）不同场景的风险控制要点

微生物培养与操作：需在生物安全柜内进行，避免开盖操作；离心时使用密封转头，离心后静置10分钟再开盖。

动物实验：实验动物需来自合格供应商，饲养环境符合SPF（无特定病原体）标准；操作感染动物时需佩戴护目镜、双层手套，避免被动物抓咬。

样本运输：样本需装入防漏、抗压的双层容器，外层标注“生物危害”标识；运输人员需接受培训，掌握应急处置方法。

三、实验室生物安全操作规范

（一）个人防护装备（PPE）使用

1.选择原则：根据实验风险等级选择PPE。BSL2实验室需穿戴工作服、手套、护目镜；BSL3实验室需额外配备正压式防护服或全封闭呼吸防护器。

2.穿戴流程（以BSL2实验室为例）：

洗手→穿连体工作服→戴一次性手套（覆盖袖口）→戴护目镜（调整至无漏光）→戴N95口罩（做气密性测试：双手捂住口罩，呼气时无漏气，吸气时口罩内陷）。

3.脱卸流程（关键：避免污染外层接触皮肤）：

摘护目镜（手持镜腿，避免接触镜面）→解工作服领口→脱手套（外表面内折，避免接触皮肤）→脱工作服（从肩部下拉，内面朝外折叠）→洗手→摘口罩（手持耳带，避免接触口罩表面）。

（二）微生物操作规范

1.无菌操作：实验前用75%乙醇擦拭操作台，紫外灯照射30分钟；操作时酒精灯火焰周围10cm为无菌区，避免说话或走动。

2.锐器管理：禁止用手直接接触针头、玻片等锐器；使用后的锐器需立即放入防刺、防漏的专用容器（如黄色锐器盒），装满3/4时密封。

3.气溶胶控制：避免剧烈震荡、吸管吹打液体；接种平板时倾斜45°，防止液体飞溅。

（三）实验室环境与废物管理

1.清洁消毒：

日常消毒：实验结束后用1000mg/L含氯消毒液擦拭台面、仪器表面，作用30分钟后用清水擦拭。

终末消毒：生物安全柜使用后需运行30分钟，并用75%乙醇擦拭内部；被病原微生物污染的区域需用2000mg/L含氯消毒液覆盖，作用60分钟后清理。

2.废物处置：

感染性废物（