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响应面法优化鹿茸菇原生质体制备工艺的研究
目录
文档概括．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3
1.1研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3
1.1.1鹿茸菇的价值概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5
1.1.2原生质体研究的重要性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7
1.2国内外研究现状．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8
1.2.1霉菌原生质体研究进展．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11
1.2.2鹿茸菇生物技术及其应用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14
1.2.3响应面法优化方法概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17
1.3本研究目标与内容．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18
1.3.1核心研究目的．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24
1.3.2主要研究内容与拟解决的关键问题．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25
1.4技术路线与研究方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．27
1.5论文结构安排．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28
材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31
2.1试验材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32
2.1.1菌株来源与保藏．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33
2.1.2培养基配方．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．34
2.2主要仪器与试剂．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35
2.2.1常用仪器设备．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．41
2.2.2关键实验试剂．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．44
2.3试验方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．46
2.3.1菌种培养与活化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．47
2.3.2鹿茸菇原生质体制备基础工艺研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．49
2.3.3原生质体质量评价指标建立．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．52
2.3.4响应面分析法优化原生质体制备工艺．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．53
结果与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．57
3.1鹿茸菇原生质体制备基础工艺单因素考察结果．．．．．．．．．．．．．．58
3.1.1不同碳源对产孢的影响分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．60
3.1.2不同采孢方式对效率的检验．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．61
3.1.3主要溶壁酶组合及浓度对原生质体获取的影响．．．．．．．．．．．．63
3.1.4不同清洗液对原生质体活力的影响比较．．．．．．．．．．．．．．．．．．67
3.2原生质体质量评价指标考察结果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．69
3.2.1原生质体数量测定方法的验证．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．72
3.2.2原生质体存活率测定方法的可靠性分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．73
3.3响应面法优化鹿茸菇原生质体制备工艺结果．．．．．．．．．．．．．．．．75
3.3.1BoxBehnken试验结果与统计分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．76
3.3.2建立响应面回归方程及其显著性检验．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．82
3.3.3各影响因素的主次关系及交互作用分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．84
3.3.4原生质体制备工艺条件的优化结果预测．．．．．．．．．．．．．．．．．．85
3.3.5优化工艺条件的验证试验与分析．．
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