木毒蛾钙黏蛋白基因的克隆及其表达与结构特点分析.pdfVIP

福建农林大学学报(自然科学版)ｈｔｔｐｓ://ｊｆａｆｕ.ｆａｆｕ.ｅｄｕ.ｃｎ第５４卷第１期

ＪｏｕｒｎａｌｏｆＦｕｊｉａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅａｎｄＦｏｒｅｓｔｒｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ(ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＥｄｉｔｉｏｎ)２０２５年１月

引用格式:孙媛媛ꎬ陈佳宁ꎬ倪涛ꎬ等.木毒蛾钙黏蛋白基因的克隆及其表达与结构特点分析[Ｊ].福建农林大学学报(自然科学版)ꎬ２０２５ꎬ５４

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(１):１７２５.

ＳＵＮＹＹꎬＣＨＥＮＪＮꎬＮＩＴꎬｅｔａｌ.ＭｏｌｅｃｕｌａｒｃｌｏｎｉｎｇꎬｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｐｒｏｆｉｌｉｎｇａｎｄｓｔｒｕｃｔｕｒａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓａｎａｌｙｓｉｓｏｆｃａｄｈｅｒｉｎｆｒｏｍＬｙｍａｎｔｒｉａｘｙｌｉｎａ

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[Ｊ].ＪｏｕｒｎａｌｏｆＦｕｊｉａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅａｎｄＦｏｒｅｓｔｒｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ(ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＥｄｉｔｉｏｎ)ꎬ２０２５ꎬ５４(１):１７２５.

木毒蛾钙黏蛋白基因的克隆及其表达与

结构特点分析

孙媛媛ꎬ陈佳宁ꎬ倪涛ꎬ任昊杰ꎬ蔡鹏宁ꎬ彭显程ꎬ张飞萍ꎬ王荣

(福建农林大学林学院生态公益林重大有害生物防控福建省高校重点实验室ꎬ福建福州３５０００２)

摘要:【目的】探究木毒蛾钙黏蛋白(ＬｘＣａｄ)的分子特征、表达量及其与Ｃｒｙ１Ａｃ毒素的分子互作机制ꎬ为深入研究Ｃｒｙ毒素

受体蛋白提供参考ꎮ【方法】以木毒蛾４龄幼虫ｃＤＮＡ为模板ꎬ通过ＲＴ￣ＰＣＲ技术对ＬｘＣａｄ基因进行克隆并进行生物信息学

分析ꎻ利用ｑＲＴ￣ＰＣＲ技术分析该基因在木毒蛾幼虫不同龄期及不同组织(头、中肠、表皮)中的表达模式ꎻ通过毒力测定获

得Ｃｒｙ１Ａｃ毒素对木毒蛾２龄幼虫的致死中浓度(ＬＣ)ꎬ并利用ｑＲＴ￣ＰＣＲ分析经ＬＣ的Ｃｒｙ１Ａｃ胁迫后ＬｘＣａｄ的表达量ꎻ对

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ＬｘＣａｄ进行同源建模ꎬ并从ＰＤＢ数据库中下载Ｃｒｙ１Ａｃ３Ｄ模型ꎬ利用计算机模拟蛋白蛋白对接ꎬ预测蛋白蛋白相互作用

的氨基酸残基ꎮ【结果】克隆获得木毒蛾中肠ＬｘＣａｄ基因(ＧｅｎＢａｎｋＩＤ:ＭＮ３８００３５.１)开放阅读框(ＯＲＦ)全长序列ꎬ全长为

５１７２ｂｐꎬ编码１７２３个氨基酸ꎬ理论分子质量为１９４ｋｕꎬ等电点为４.２４ꎻ推断出的氨基酸序列包括１个信号肽(ＳＩＧ)、１个前

蛋白区(ＰＲＯ)、１２个Ｃａｄ重复区(ＣＲ)、１个近膜区(ＭＰＲ)、１个跨膜区(ＴＭ)以及１个胞质区(ＣＹＴ)ꎻ序列比对和进化树分

析表明ꎬＬｘＣａｄ与舞毒蛾的ＬｄＣａｄ的一致性最高ꎮｑＲＴ￣ＰＣＲ结果表明ꎬＬｘＣａｄ主要分布于木毒蛾幼虫肠道ꎬ在５龄幼虫中的

表达量最高ꎬ在６龄幼虫中次之ꎬ低龄幼虫表达量较低ꎻ使用Ｃｒｙ１Ａｃ毒素对木毒蛾２龄幼虫进行胁迫后ꎬ发现ＬｘＣａｄ的表达

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量相比于对照组显著上调ꎮ蛋白蛋白分子对接分析结果表明ꎬＣｒｙ１Ａｃ毒素和ＬｘＣａｄ受体中分别有多个氨基酸残基通过氢

键相互作用ꎬ这些氨基酸残基分别位于ＰＲＯ、ＣＲ８以及ＣＲ９中ꎮ【结论】木毒蛾ＬｘＣａｄ可能是Ｃｒｙ１Ａｃ的潜在受体蛋白ꎮ

关键词:木毒蛾ꎻ钙黏蛋白ꎻＣｒｙ毒素受体ꎻ表达谱分析ꎻ分子对接

中图分类号:Ｓ７６３.３

文献标识码:Ａ

文章编号:１６７１￣５４７０(２０２５)０１￣００１７￣０９开放科学(资源服务)

ＤＯＩ:１０.１３３２３/ｊ.ｃｎｋｉ.ｊ