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计算公式每克样品中的菌落数=(C÷V)×M,其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL),M代表稀释倍数。第62页,共69页,星期日,2025年,2月5日4、实验结果的观察第63页,共69页,星期日,2025年,2月5日目的明确营养协调理化条件适宜经济节约据不同的微生物的营养要求配制针对强的培养基。培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长繁殖和代谢产物的形成和积累如:pH五、实验操作:(一)、培养基配置原则第30页,共69页,星期日,2025年,2月5日无菌技术的体现是什么?五、实验操作:(二)、倒平板倒多少?5—10分中后倒平板\标记?50℃刚好不烫手约1/3为何如此进行?何时开始?第31页,共69页,星期日,2025年,2月5日1.倒平板\接种完成后,平板都要倒置?2.倒平板过程中如果溅到皿壁上,该培养基能用吗?最好不用,微生物可能在皿盖与皿底之间生存思考题第32页,共69页,星期日,2025年,2月5日五、实验操作(三)、纯化大肠杆菌---平板划线法1、无菌操作技术有哪些?2.定义:什么叫菌落?平板划线法?目的是什么?3、平板划线操作:*平板划线是如何操作的:你能将其总结成3步骤吗?I]、为何操作第一步,每次划线之前都要灼烧菌环?操作完成后还要灼烧菌环?2]、灼烧之后要等菌环冷却后再划线?3]、在做第二次划线之后的划线操作,为何总是从第一次的末端开始划线?4]、划线时为何不能划破培养基?第33页,共69页,星期日,2025年,2月5日1、定义1]、什么叫菌落?2]、平板划线法?一个细胞繁殖来的肉眼可见的子细胞群体通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作使菌种分散到培养基的表面.五、实验操作(三)、平板划线----纯化大肠杆菌通过菌落来记数---活菌第34页,共69页,星期日,2025年,2月5日2、平板划线操作:P18讨论题:I]、为何操作第一步,每次划线之前都要灼烧菌环?操作完成后还要灼烧菌环?2]、灼烧之后要等菌环冷却后再划线?灭菌:接种前:污染菌环灭菌;划线前:灭上一条线剩余的大肠杆菌接种后:灭菌环上的菌防感染操作者、污染环境防杀死菌种第35页,共69页,星期日,2025年,2月5日2、平板划线操作:3]、在做第二次划线之后的划线操作,为何总是从第一次的末端开始划线?4]、划线时为何不能划破培养基?划线是为稀释菌液,末端菌液细菌的数目比前端少从末端开始能使菌数随着划线次数的增而数目减少,得到单个菌-----菌落划破将不能对菌鉴别、分离、记数第36页,共69页,星期日,2025年,2月5日复习巩固:1、为何平板要倒过来放置?2、倒平板如果倒到平皿的壁上,该培养基还能用吗?3、平板划线法与稀释涂布法的目的是什么?4、在倒平板、平板划线、稀释涂布中无菌技术是什么?5、P18讨论题?第37页,共69页,星期日,2025年,2月5日1.灼烧接种环,直至将接种环_______2.在_______旁冷却接种环,并打开棉塞3.试管口通过火焰.4.将已______的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液6.将皿盖打开一条缝隙,将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内,划__________条平行线,盖上皿盖。注意不要划破培养基。5.试管通过火焰,并塞上棉塞火焰冷却三至五7.灼烧接种环,待其冷却后,从第一区域划线的_______开始往第二区域内划线。重复以上操作,在三、四区域内划线。末端烧红8.将平板_____放入培养箱中培养。倒置第38页,共69页,星期日,2025年,2月5日两区不可相连接第39页,共69页,星期日,2025年,2月5日第40页,共69页,星期日,2025年,2月5日方法一:平板划线操作:步骤:1.接种环灼烧灭菌2.接种:冷却的菌环取菌---试管口过酒精灯后取菌----试管口过酒精灯上塞----划线.(火焰旁,前后灼烧菌环)3.结束后灼烧菌环平板划线法和稀释涂布平板法微生物的接种的常用接种方法有:小结:五、实验操作
(三)、平板划线----纯化大肠杆菌第41页,共69页,星期日,2025年,2月5日方法二:稀释涂布平板操作步骤阅读思考:1]、稀释的目的是什么?2]、涂布器为何在涂布前浸在酒精液中和在火焰上引燃?3]、为何2步中
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