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2025年艾梅乙技能操作考试试题及答案

一、HIV抗体快速检测（胶体金法）操作试题

操作要求：使用某品牌HIV-1/2抗体快速检测试剂（胶体金法），对编号01的血清样本进行检测，完成从样本接收至结果判读的全流程操作。

操作步骤及评分标准（总分30分）：

1.操作前准备（5分）

-检查实验室环境：温湿度是否符合要求（温度15-30℃，湿度≤80%），记录温湿度（2分）；

-核对样本信息：样本编号01）、类型（血清）、采集时间（2025-03-1508:00）与检测申请单一致（1分）；

-检查试剂：确认试剂在有效期内（2027-05-01），包装完整无破损，配套缓冲液无浑浊（1分）；

-个人防护：穿戴一次性手套、实验室白大衣，佩戴护目镜（1分）。

2.样本处理（5分）

-样本状态观察：血清无溶血、脂血、黄疸（1分）；

-离心要求：若样本未离心，需以3000r/min离心10分钟（本试题样本已离心，跳过此步）（1分）；

-加样准备：用10μL移液器吸取样本，检查移液器量程是否校准（1-10μL）（1分）；

-避免交叉污染：样本管开盖后管口向下倾斜，移液器吸头一人一换（1分）。

3.检测操作（10分）

-加样：在检测卡加样孔（S孔）垂直滴加1滴样本（约20μL），避免气泡（2分）；

-加缓冲液：立即在缓冲液孔（B孔）滴加2滴配套缓冲液（约80μL），滴加过程中保持滴管垂直（2分）；

-反应时间控制：启动计时器，等待15分钟判读结果（提前或延后超过2分钟扣2分）（2分）；

-对照设置：同时检测阴性对照（无HIV抗体血清）和阳性对照（含HIV抗体血清）各1份（2分）；

-防止污染：操作过程中检测卡平放于实验台面，避免移动或倾斜（2分）。

4.结果判读（5分）

-阴性结果：仅质控线（C线）显色，检测线（T线）无显色（1分）；

-阳性结果：C线和T线均显色（1分）；

-无效结果：C线未显色（无论T线是否显色）（1分）；

-本试题样本结果：C线清晰，T线无显色（判为阴性）（1分）；

-对照结果验证：阴性对照仅C线显色，阳性对照C线和T线均显色（1分）。

5.操作后处理（5分）

-废弃物处理：检测卡、吸头放入黄色医疗废物袋，样本管密封后放入2层防漏袋（2分）；

-台面消毒：用75%酒精擦拭操作区域，作用15分钟（1分）；

-记录填写：在检测记录表中登记样本编号、检测时间、结果、操作人员（1分）；

-试剂归位：剩余试剂放回2-8℃冰箱，缓冲液室温保存（1分）。

二、梅毒血清学检测（TRUST试验）操作试题

操作要求：使用甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）试剂，对编号02的血清样本进行定性及半定量检测。

操作步骤及评分标准（总分30分）：

1.试剂与样本准备（5分）

-试剂复温：TRUST抗原悬液从2-8℃取出后室温放置30分钟，轻轻摇匀至无沉淀（2分）；

-样本处理：血清样本3000r/min离心10分钟，取上清（1分）；

-器材准备：专用反应卡片（10孔/张）、10μL移液器、定性移液针（每孔50μL）（1分）；

-对照设置：同时检测阴性对照（非梅毒血清）和阳性对照（梅毒阳性血清）（1分）。

2.定性检测（10分）

-加样：在反应卡第1孔加入50μL样本（使用定性移液针垂直滴加，避免气泡）（2分）；

-加抗原：用专用滴管吸取抗原悬液，垂直滴加1滴（约50μL）于样本孔中（2分）；

-混匀与反应：卡片置旋转器上，以100±5转/分钟旋转8分钟（1分）；

-判读条件：在光线充足处肉眼观察结果（1分）；

-结果判读：

-阳性（+）：出现中等或大的红色凝集颗粒（2分）；

-阴性（-）：均匀红色，无凝集颗粒（2分）。

3.半定量检测（10分）

-稀释样本：将原血清用生理盐水做倍比稀释（1:2、1:4、1:8…至1:64）（2分）；

-加样：每个稀释度取50μL加入反应卡对应孔（第2-7孔）（2分）；

-加抗原与反应：每孔滴加1滴抗原，旋转8分钟（同定性步骤）（2分）；

-终点滴度判定：以最高稀释度仍出现阳性反应的稀释度为滴度（如1:32阳性，1:64阴性，则滴度为1:32）（2分