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甲肝抗体样本检测的风险评估 一、一般生物学特性概述 1、起源 1973年Feinstone应用免疫电镜技术从急性肝炎患者粪便中发现。由于其理化性状与肠道病毒相似，1982年国际病毒命名委员会将其分为小RNA病毒科肠道病毒属72型。但由于有些特性并不与肠道病毒相同，如HAV在细胞内增殖迟缓，不引起CPE等，故近年又被单列为小RNA病毒科的肝病毒属。 2、基因组及基编码产物 单股正链RNA，约7.4kb,分5’非编码区、编码区和3’非编码区。5’非编码区起到识别和链接宿主核糖体的作用。5’末端的第735个碱基处开始有一个单一的开放读码框架，编码一种多聚蛋白，并被病毒蛋白酶水解成非结构蛋白和结构蛋白。结构蛋白是一个大分子蛋白质，断裂成VP1、VP2、VP3、VP4。VP1是衣壳蛋白，诱发中和抗体。 人类HAV为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅶ型，主要是Ⅰ、Ⅲ型，仅个别毒株为Ⅱ和Ⅶ型。HAV仅为一个血清型。与其他肝炎病毒无交叉反应。 3、形态特征 圆球状，直径约27nm，无包膜，呈20面对称体，有饱满和空心两种颗粒。病毒颗粒以五聚体前体进行装配。12个五聚体以一种浓度依赖形式装配成空的衣壳，不含RNA核心，具抗原性但无感染性。实心的HAV颗粒具传染性。 4、培养特性 在细胞培养中HAV不能使细胞产生病变，电镜检查也未能在细胞中找到典型的病毒颗粒。但HAV的CR326株（为狨猴適應株）可在FRhK6猴肾细胞株中连续传代，也可将病人粪便接种非洲绿猴肾细胞中连续传代，免疫荧光法可在细胞质中发现HAV抗原。我国近年发现HAV可在人胚肾细胞MERN株中增殖。 5、流行特性 主要经过粪-口途径传播，可造成暴发或散发流行，潜伏期短，发病较急，一般不转为慢性，亦无慢性携带者，预后良好。 二、致病性和感染剂量 关于甲型肝炎的发病机制研究较少，尚未完全阐明。经口感染HAV后，发病前有短暂病毒血症阶段，然后再定位于肝脏。既往认为HAV对肝细胞有直接损害作用。近年研究表明：实验感染HAV的动物肝细胞及HAV体外细胞培养时均不发生细胞病变；患者血清CD+8细胞亚群增高，致敏淋巴细胞对HAV感染的肝细胞显示细胞中毒性；肝内炎症反应明显等。根据研究结果，目前认为，其发病机制倾向于以宿主免疫反应为主。发病早期，可能由于HAV在肝细胞中大量增殖及CD+8细胞毒性T细胞杀伤作用共同造成肝细胞损害，病后期可能以免疫病理损害为主。甲型肝炎病毒在肝细胞内复制的过程中仅引起肝细胸轻微损害，在机体出现一系列免疫应答(包括细胞免疫及体液免疫）后，肝脏出现明显病变，表现为肝细胞坏死和炎症反应。HAV通过被机体的免疫反应所清除，因此，一般不发展为慢性肝炎，肝硬化或病毒性携带状态。其致病机制除病毒直接作用外，肝脏免疫病理损伤也起作用。病后产生抗HAV的IgG抗体，且可维持多年，对病毒再感染有免疫力。甲型肝炎的预后较好。 三、感染途径及潜在暴露结果 致病性与免疫性 传染源为患者，主要通过粪—口途径传播。HAV随粪便排出体外，污染水源、食物和海产品等，造成散发流行或大流行，潜伏期15～50天。病毒侵入人体后，在局部繁殖，入血形成病毒血症，再进入肝内，引起甲型肝炎。 四、环境中的稳定性 HAV在体外抵抗力较强，乙醚pH3、56°C 30min不能使它灭活。在-20℃条件下保存数年，其传染性不变，但在100°C 5min可杀死HAV，甲醛或氯处理可使它灭活。 五、被操作微生物的浓度和剂量的影响 在进行HAV抗体检测时要防止血清污染。 六、自然宿主和易感人群 人类对各型肝炎普遍易感，各种年龄均可发病。甲型肝炎感染后机体可产生较稳固的免疫力，在本病的高发地区，成年人血中普遍存在甲型肝炎抗体，发病者以儿童居多。 ⑴职业易感人群：处理污物或污水的工人；食品行业从业人员，如果他们接触那些没有包装的食品，而这些食品是没有经过烹调的，他们就有可能受到感染。如果工作人员感染了HAV，他们就会污染食物，从而有可能造成在使用这些食品的人中发生爆发流行；与儿童接触的工作人员。如在托儿所、幼儿园、学校等工作的人员；医务工作者；实验室从事检验的人员；生活在低传染地区到中度或高度流行地区旅行、出差的商人、外交人员、 军人等。 ⑵个体易感者：生活在低传染地区到中度或高度流行地区旅行的个人；与易感HAV接触的人（集体、监狱、多人口家庭）；儿童-主要病毒宿主，是儿童-成人传播方式的传染源；患慢性肝病的人，他们对HAV十分敏感；多次输血的人；静脉吸毒者；男性同性恋者。 七、实验动物研究，实验室感染和院内感染信息 HAV的易感动物较多：猩猩、美洲绒猴、猕猴、恒河猴等众多灵长类动物对HAV敏感。我国学者毛江森以HAV感染浙江红面猴，余昌晏以HAV感染广西树猴均获成功。 八、实验活动评估 1.样品采集 HAV抗体检测主要采集血液样品，样品采集的工作人员