核酸检测篇-3基因芯片.pdfVIP

编号：2-3

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概述：

（又称、生物）技术系指将大量（通常每平方厘米点

阵密度高于400）探针分子固定于支持物上后与标记的样品分子进行杂交，通

过检测每个探针分子的杂交信号强度进而获取样品分子的数量和序列信息。通

俗地说，就是通过微加工技术，将数以万计、乃至百万计的特定序列的

片段（探针），有规律地排列固定于2cm2的硅片、玻片等支持物

上，构成的一个二维探针阵列，与计算机的电子十分相似，所以被

称为。主要用于工作。

又称为微阵列(microarray)，可分为三种主要类型：1）

固定在聚合物基片（尼龙膜，硝酸纤维膜等）表面上的探针或c片段，

通常用同位素标记的靶与其杂交，通过显影技术进行检测。这种方法

的优点是所需检测设备与目前分子生物学所用的显影技术相一致，相对比

较成熟。但上探针密度不高，样品和试剂的需求量大，定量检测存在较多

合量也比较一致，但在和批量化生产方面仍有不易克服的。3）在玻

璃等硬质表面上直接合成的寡核苷酸探针阵列，与荧光标记的靶杂交进行

有着十分重要的发展潜力。

目的：

功能的研究。通过可以大规模，高通量地对成千上万个进行

同时研究。

原理：

的原理是杂交方法，即通过与一组已知序列的探针杂交

进行序列测定的方法。在一块基片表面固定了序列已知的八核苷酸的探针，

当溶液中带有荧光标记的序列，例如TATGCAATCTAG，与上对应

位置的探针产生互补匹配时，通过确定荧光强度最强的探针位置，获得一组

序列完全互补的探针序列。据此可重组出靶的序列。

的原理图

步骤：

1.样品的准备：由于灵敏度所限，多数方法需要在标记和分析前对样品进行适

当的扩增。

2.杂交检测，显色和分析测定方法主要为荧光法，其重复性较好，但灵敏度较

低。目前正在发展的方法有质谱法、化学发光法、光导纤维法等。以荧光法为

例，当前主要的检测是激光共聚焦显微扫描技术，以便于对高密度探针阵

列每个