第五讲胚胎工程.ppt

第1页，共40页，星期日，2025年，2月5日基本内容超数排卵、胚胎培养、胚胎保存、胚胎移植、胚胎分割、性别鉴定、胚胎嵌合、细胞核移植、体外受精、基因导入以及胚胎干细胞第2页，共40页，星期日，2025年，2月5日超数排卵超数排卵是一种不正常的排卵，经外源激素处理的雌性动物，改变其性周期，使之按照预定时间超常量的排卵。1只KM小鼠取得胚胎83枚，有1只兔取得胚胎88枚，有1只金黄地鼠采得72枚胚胎第3页，共40页，星期日，2025年，2月5日超数排卵的生理基础第4页，共40页，星期日，2025年，2月5日促卵泡激素(FSH)FSH为糖蛋白激素，由α、β两个亚单位结合，β亚单位是决定生物活性的其生物功能是刺激卵巢中卵泡成熟并分泌雌激素。第5页，共40页，星期日，2025年，2月5日促黄体激素(LH)也称促间质细胞激素(ICSH)，为糖蛋白质激素.LH的α和β两个亚单位相互结合在一起时，才具有强的生物活性。LH所特有的生物作用是由β亚单位决定的它的生物功能是激发排卵，促使黄体从萎缩破裂的卵泡中形成并分泌雌激素和孕激素。第6页，共40页，星期日，2025年，2月5日孕马血清促性腺激素(PMSG)这是一种比较特殊的促性腺激素，是一种糖蛋白结构PMSG分子，包含α和β亚单位，β亚单位是体现生物活性的功能团。在活体中，PMSG的半存留期，比垂体和其他胎盘促性腺激素要长。PMSG的β亚单位只能和PMSG的α亚单位结合；但是，PMSG的α亚单位可以和FSH的β亚单位、LH的β亚单位及HCG的β亚单位结合，而且使这几种β亚单位都具有生物活性。第7页，共40页，星期日，2025年，2月5日人绒毛膜促性腺激素(HCG)是人胎盘分泌的一种糖蛋白激素。HCG分子包含α和β亚单位。受精卵着床的第1天，孕体的滋养层细胞开始分泌HCG，孕后10d左右在尿中和血中都可以查出来。有人把HCG叫做全身激素，胎儿的HCG遗传密码能产生大量HCG，而成年人各组织和多种癌细胞也能产生HCG。但是只有胎盘的HCG是经滋养糖基化的糖蛋白质激素，这样的HCG才具有生物活性。HCG分子中的α和β亚单位一定是结合的形式，β亚单位才能够体现出生物活性，生物活性的强弱是β亚单位上的唾液酸含量决定的。HCG的生理作用是多方面的，这里主要是它促卵泡发育并排卵的作用，增大超数排卵的效果。第8页，共40页，星期日，2025年，2月5日超数排卵的影响因素动物遗传特性、体况、营养状态、年龄、发情周期的阶段、卵巢的功能状态、季节、温度激素的品种与用量第9页，共40页，星期日，2025年，2月5日胚胎培养二十世纪30年代Nicholas和Rudnik就开始对啮齿动物胚胎进行体外培养并获得成功。啮齿类动物着床后胚胎培养(WEC)不仅被胚胎学家运用于胚胎正常发育的研究，而且其在环境致畸物的筛检及致畸机理研究中的应用亦愈来愈受到人们的重视。第10页，共40页，星期日，2025年，2月5日胚胎保存超低温长期冻存胚胎具有较强的实际意义。它能够使优秀品种品系(包括珍稀和濒危动物)的种质得到长期保存下来，逐步地将生物界的所有生命基因都长期保存起来，防止基因丢失，并且可以随时复苏、繁殖品系动物，在遗传理论指导下，可改良品种和培育新品种及品系，推动生命科学蓬勃发展。胚胎的低温保存不但安全可靠，而且可以减少大量的空间和财力上的支出，因此它是目前实现实验动物资源保存的最为有效的方法。世界上一些发达国家以此方法建立起了各自的包括实验动物在内的胚胎库，目前我国国家啮齿类实验动物种子中心和上海分中心等单位正在开展胚胎和配合子低温保存的研究。第11页，共40页，星期日，2025年，2月5日胚胎保存的方法缓慢降温法玻璃化低温保存法。第12页，共40页，星期日，2025年，2月5日两种方法的比较两种方法最大的不同点在于缓慢冷冻方法可靠安全，但需要特殊的仪器设备(程序降温仪等)，该方法适用于大型实验动物单位和保种单位；而玻璃化低温保存则对设备要求相当低，利于普及，适用于保存一些特殊品系且数量较少的单位。第13页，共40页，星期日，2025年，2月5日胚胎嵌合将动物品系内、种内、种间或属间的两个或多个胚胎以聚合或注入等方法嵌合在一起培养，使之发育成为一个胚胎，称为嵌合胚胎。再将该胚胎移植给受体，发育成个体。如该动物具有两种以上动物胚胎的细胞则称之为嵌合体动物，如同类黑鼠和白鼠胚胎嵌合，生下黑白相间的花小鼠。目前嵌合体动物有小鼠、大鼠、绵羊、山羊、猪和牛等；种间嵌合体动物有大鼠-小鼠嵌合体，绵羊-山羊嵌合体，马-斑马嵌合体，牛-水牛嵌合体等。第14页，共40页，星期日，2025年，2月5日嵌合体技术

动物胚胎嵌合技术即