细胞工程及其应用.pptVIP

菠萝再生植株叶的培养第63页，共74页，星期日，2025年，2月5日影响植物细胞脱分化和再分化因子影响因子渗透压酸碱度温度湿度光照无机盐类有机物类植物激素天然复合物环境条件培养基的组成（营养条件）内因外因遗传特性生理状态第64页，共74页，星期日，2025年，2月5日4、杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞，只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞，因此，必须进行筛选和克隆化。通常采用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化培养。采用灵敏、快速、特异的免疫学方法，筛选出能产生所需单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞，并进行克隆扩增。经过全面鉴定其所分泌单克隆抗体的免疫球蛋白类型、亚类、特异性、亲和力、识别抗原的表位及其分子量后，及时进行冻存。简要介绍单克隆抗体的制备过程

第31页，共74页，星期日，2025年，2月5日5、单克隆抗体的大量制备单克隆抗体的大量制备重要采用动物体内诱生法和体外培养法。(1)体内诱生法取Balb/c小鼠，首先腹腔注射0.5ml液体石腊或降植烷进行预处理。1-2周后，腹腔内接种杂交瘤细胞。杂交瘤细胞在小鼠腹腔内增殖，并产生和分泌单克隆抗体。约1-2周，可见小鼠腹部膨大。用注射器抽取腹水，即可获得大量单克隆抗体。简要介绍单克隆抗体的制备过程

第32页，共74页，星期日，2025年，2月5日(2)体外培养法将杂交瘤细胞置于培养瓶中进行培养。在培养过程中，杂交瘤细胞产生并分泌单克隆抗体，收集培养上清液，离心去除细胞及其碎片，即可获得所需要的单克隆抗体。但这种方法产生的抗体量有限。近年来，各种新型培养技术和装置不断出现，大大提高了抗体的生产量。简要介绍单克隆抗体的制备过程

第33页，共74页，星期日，2025年，2月5日简要介绍单克隆抗体的制备过程杂交瘤细胞融合后，要进行筛选后才能使用。杂交瘤细胞分为两次：一、筛选出杂交瘤细胞;二、在初选的杂交瘤细胞中筛选出能产生特异性抗体的杂家瘤细胞，这两次筛选的方法和原理各不相同。第34页，共74页，星期日，2025年，2月5日第35页，共74页，星期日，2025年，2月5日大规模生产单克隆抗体流程第36页，共74页，星期日，2025年，2月5日单克隆抗体的应用主要用于疾病的诊断、治疗和预防。与常规抗体相比，具有特异性强、灵敏度高的优点。如；各种癌症、肝炎病毒、SARS病毒、细菌及血吸虫等数百种疾病的诊断；在疾病治疗方面，单克隆抗体犹如人体卫士，能识别“自己”与“异己”，一旦发现致病因素便与之结合将其杀死。若在单抗上带上抗癌药物制成“生物导弹”，将药物定向带到癌细胞所在部位，既消灭了癌细胞又不会伤害健康细胞。第37页，共74页，星期日，2025年，2月5日因无细胞壁，大多数动物细胞需附着在固体或半固体表面才能生长对营养要求较苛刻，除了需要与微生物、植物细胞一样的培养基成分外，一般需要血清或动物激素对环境更敏感，培养条件的控制更严格生长缓慢，培养时间较长，对反应器要求要长时间适应无菌状态培养。动物细胞培养的特点：第38页，共74页，星期日，2025年，2月5日三、动物细胞培养方法1、悬浮培养法2、贴壁细胞培养法3、固定化细胞培养贴壁细胞培养法－微载体培养第39页，共74页，星期日，2025年，2月5日生产疫苗生产生物活性物质动物干扰素、人体干扰素、人的单克隆抗体、免疫球蛋白、生长激素等的生产。基因工程细胞培养食品：美国和荷兰科学家成功培养出人造肉四、动物细胞大量培养的应用第40页，共74页，星期日，2025年，2月5日附：动物细胞培养的产物疫苗人小儿麻痹症疫苗、狂犬疫苗、风疹疫苗、脑炎疫苗、疱疹疫苗等?动物牛病毒性腹泻疫苗、牛痢疾疫苗、犬传染性肝炎疫苗、鸡痘病疫苗、猪霍乱疫苗、牛疫狂犬疫苗、草鱼出血热疫苗单克隆抗体IgG、IgM、IgA等免疫调节剂β-细胞生长因子、干扰素、白细胞活化因子、血清胸腺因子、白细胞介素、胸腺素、巨噬细胞毒力因子等酶尿激酶、天门冬氨酰胺酶、胶原酶、细胞色素P、450、纤维蛋白溶酶原激活剂、胃蛋白酶、胰蛋白酶、酷氨酸脱羟酶等激素绒膜促性腺激素、促红细胞生成素、促滤泡激素、生长激素、促间质细胞激素、促黄体激素等第41页，共74页，星期日，2025年，2月5日思考与探究：如何用细胞培养技术，为烧伤病人植皮？取该患者的皮肤进行细胞培养,获得足量的细胞后再移植第42页，共74页，星期日，2025年，2月5日一、植物细胞培养的理论依据及研究进展1、理论依据：细胞学说:认为植物和动物都是由细胞构成的，细胞进行分裂而增多，并组建成生物