无菌操作和接种技术.pptVIP

第1页，共24页，星期日，2025年，2月5日条件结果常用的方法消毒较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线消毒法和化学药剂消毒法灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌第2页，共24页，星期日，2025年，2月5日1、煮沸消毒法：可用于饮水和一般器械（刀剪、注射器等）的消毒。2、紫外线消毒法：是利用照射紫外线杀灭微生物的一种方法，用于空气及一般物品表面消毒。照射人体能发生皮肤红斑，紫外线眼炎和臭氧中毒等。故使用时人应避开或用相应的保护措施。3、化学药剂消毒法：体积分数为70%的乙醇杀菌效果最好（手）一、消毒方法第3页，共24页，星期日，2025年，2月5日4、巴氏消毒法：是一种利用较低的温度既可杀死病菌又能保持物品中营养物质风味不变的消毒法。常用于消毒牛奶和酒类等。来源于巴斯德解决啤酒变酸的问题。当时，法国酿酒业面临着一个令人头疼的问题，那就是啤酒在酿出后会变酸，根本无法饮用。而且这种变酸现象还时常发生。巴斯德受人邀请去研究这个问题。经过长时间的观察，他发现使啤酒变酸的罪魁祸首是乳酸杆菌。营养丰富的啤酒简直就是乳酸杆菌生长的天堂。采取简单的煮沸的方法是可以杀死乳酸杆菌的，但是，这样一来啤酒也就被煮坏了。巴斯德尝试使用不同的温度来杀死乳酸杆菌，而又不会破坏啤酒本身。最后，巴斯德的研究结果是：以50~60℃的温度加热啤酒半小时，就可以杀死啤酒里的乳酸杆菌，而不必煮沸。这一方法挽救了法国的酿酒业。这种灭菌法也就被称为“巴氏灭菌法”。第4页，共24页，星期日，2025年，2月5日二、灭菌方法1、灼烧灭菌：直接用火焰杀死微生物，适用于微生物实验室的接种针、接种环等接种工具及器皿的灭菌。2、高压蒸汽灭菌（原理：高温使蛋白质和核酸变性）利用适当温度和压力的饱和水蒸汽加热杀灭微生物的一种方法。用于水、培养基、纱布、玻璃器材等耐高温高压潮湿的物品的灭菌3、干热灭菌：是利用干热空气加热杀灭微生物的一种方法（电烘箱），常用于空玻璃器皿、金属器具的灭菌。第5页，共24页，星期日，2025年，2月5日怎样验证培养基的制作是否合格？如果未接种的培养基在恒温箱中保温1～2天后无菌落生长，说明培养基的制备是合格的，否则需要重新制备。第6页，共24页，星期日，2025年，2月5日1、细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌 ()A．接种环、手、培养基 B．高压锅、手、接种环C．培养基、手、接种环 D．接种环、手、高压锅C第7页，共24页，星期日，2025年，2月5日2．据调查，市场上销售的绝大部分鸡蛋都没有经过清洗，更谈不上消毒，表面经常残留羽毛、粪便、饲料等脏物，还可能带有沙门氏菌、大肠杆菌，甚至会造成禽流感病毒传播，美国《蛋制品检查法》将表面污浊的鸡蛋列为“脏蛋”且禁止上市。下列相关叙述错误的是 ()A．生物学意义上的灭菌、消毒和防止杂菌污染各有不同的含义B．由于鸡蛋、奶等食品中的某些成分不易在高温下被破坏，对其可采取高温灭菌C．巴氏消毒法就是加热到70～80℃，保持15～30min，能杀死一般杂菌和病原菌D．高温灭菌的原理是高温破坏了细胞内的蛋白质、核酸，影响其生命活动B第8页，共24页，星期日，2025年，2月5日3．关于灭菌和消毒理解不正确的是 ()A．灭菌是指杀灭环境中的一切微生物，包括芽孢和孢子B．消毒和灭菌实质上是相同的C．接种环用灼烧法灭菌D．常用的灭菌和消毒方法有加热法、过滤法、紫外线法、化学药品法B第9页，共24页，星期日，2025年，2月5日4、氯苯化合物是重要的有机化工原料，因其不易降解，会污染环境。某研究小组依照下列实验方案(图1)筛选出能高效降解氯苯的微生物SP1菌。培养基配方如表1。第10页，共24页，星期日，2025年，2月5日(1)配制Ⅱ号固体培养基时，除添加Ⅱ号液体培养基成分外，还应添加1%的________。(2)培养基配制时，灭菌与调pH的先后顺序是________________。(3)从用途上来说，Ⅰ号培养基和Ⅱ号培养基分别属于________培养基和________培养基。在Ⅱ号培养基中，为SP1菌提供氮源的成分是________。(4)在营养缺乏或环境恶劣时，SP1的菌体会变成一个圆形的休眠体，这种休眠体被称为__