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细胞工程与基因工程第1页,共35页,星期日,2025年,2月5日BCA生物工程的技术体系细胞工程的基本原理基因工程的基本原理细胞工程与基因工程第2页,共35页,星期日,2025年,2月5日酶生物活性分子天然细胞天然细胞干细胞工程干细胞工程细胞组织器官个体组织工程组织器官个体生物活性分子发酵工程细胞工程代谢工程分离工程分离工程酶工程采集破碎蛋白质工程途径工程基因工程生物工程的技术体系细胞工程分离工程分离工程第3页,共35页,星期日,2025年,2月5日细胞工程的基本原理细胞工程是指通过组织、细胞、细胞器水平上的筛选和改造,获得具有商业价值的人造组织(器官)、工程细胞株或细胞系,再通过规模化培养,制备特殊产品的技术和过程。细胞工程包括:动植物细胞及组织大规模培养技术动植物细胞融合技术动植物细胞重组技术干细胞技术(组织或器官再生技术,即组织工程)第4页,共35页,星期日,2025年,2月5日植物细胞和组织的大规模培养技术基本原理:植物细胞的分化全能性第5页,共35页,星期日,2025年,2月5日动物细胞的大规模培养技术基本原理:动物细胞的接触抑制性第6页,共35页,星期日,2025年,2月5日动植物细胞融合技术将两种不同性状的细胞在促融剂的帮助下融合在一起,并从中筛选出具有优异性能的杂合细胞。例如,B淋巴细胞具有合成特异性抗体的性状,骨髓瘤细胞具有生长迅速的性状。将两者融合,就能筛选到集两者优点的杂合细胞,即单克隆抗体技术。第7页,共35页,星期日,2025年,2月5日细胞重组是把不同种类的细胞的部件重新组合装配,包括细胞核移植、叶绿体移植、核糖体重建及线粒体装配等,由此获得具有优良性能的重组细胞株或细胞系动植物细胞重组技术第8页,共35页,星期日,2025年,2月5日经历277次乳腺细胞核的移植实验;获得29个发育为八细胞胚;使用13头代孕母亲;生出多莉动植物细胞重组技术第9页,共35页,星期日,2025年,2月5日骨髓多能干细胞骨髓细胞淋巴细胞网状细胞红细胞巨核细胞血小板单核细胞巨噬细胞嗜中酸碱性粒细胞B、T淋巴细胞干细胞技术(组织或器官再生技术)第10页,共35页,星期日,2025年,2月5日基因工程的基本原理切接转增检第11页,共35页,星期日,2025年,2月5日DNA的体外重组:切与接用限制性核酸内切酶切割DNA分子识别双链DNA分子中4-8对碱基的特定序列大部分酶的切割位点在识别序列内部或两侧识别切割序列呈典型的旋转对称型回文结构5’…GCTGAATTCGAG…3’3’…CGACTTAAGCTC…5’EcoRI的识别序列EcoRI的切割位点第12页,共35页,星期日,2025年,2月5日EcoRI等产生的5’粘性末端5’…G-C-T-G-A-A-T-T-C-G-A-G…3’3’…C-G-A-C-T-T-A-A-G-C-T-C…5’EcoRI37℃5’…G-C-T-G-OHP-A-A-T-T-C-G-A-G…3’3’…C-G-A-C-T-T-A-A-POH-G-C-T-C…5’退火4-7℃5’…G-C-T-GA-A-T-T-C-G-A-G…3’3’…C-G-A-C-T-T-A-AG-C-T-C…5’OHPOHP第13页,共35页,星期日,2025年,2月5日PstI等产生的3’粘性末端5’…G-C-T-C-T-G-C-A-G-G-A-G…3’3’…C-G-A-G-A-C-G-T-C-C-T-C…5’PstI37℃5’…G-C-T-C-T-G-C-A-OHP-G-G-A-G…3’3’…C-G-A-G-POH-A-C-G-T-C-C-T-C…5’退火4-7℃5’…G-C-T-C-T-G-C-AG-G-A-G…3’3’…C-G-A-GA-C-G-T-C-C-T-C…5’OHPOHP第14页,共35页,星期日,2025年,2月5日PvuII等产生的平头末端5’…G-C-T-C-A-G-C-T-G-G-A-G…3
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