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利用VIGS分析SmWRKY30在茄子抗青枯病中的作用.pdf

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中国农业科学2025,58(3):548-563

ScientiaAgriculturaSinicadoi:10.3864/j.issn.0578-1752.2025.03.011

利用VIGS分析SmWRKY30在茄子抗青枯病中的作用

1,21,222312

张林琳,宫瑞,崔彦玲,钟雄辉,李烨,李然红,潜宗伟

12

牡丹江师范学院生命科学与技术学院,黑龙江牡丹江157011;北京市农林科学院蔬菜研究所/蔬菜生物育种全国重点实验室/国家蔬菜工程技术研

3

究中心/蔬菜种质改良北京市重点实验室,北京100097;黑龙江省农业工程职业学院,哈尔滨150070

摘要:【目的】转录因子WRKY在植物抗病、抗逆过程中具有重要的调控作用。番茄SlWRKY30是抗青枯病的关键基因,茄

子SmWRKY30与番茄SlWRKY30为同源基因。通过青枯菌诱导及基因沉默体系建立,探究茄子SmWRKY30对茄子青枯病的调

控作用,为茄子抗青枯病资源的创制和品种选育奠定基础。【方法】以茄子抗病材料YS40和感病材料ZP80为试验材料,

克隆SmWRKY30,分析基因、氨基酸和启动子序列差异。青枯菌诱导后,分析2种材料不同组织中SmWRKY30的表达量变化

差异。比较茄子与番茄接菌后STH2的表达量变化,分析茄子SmWRKY30与番茄SlWRKY30作用机制的异同。构建基因沉默

体系,比较清水组、空载组与试验组植株的病情指数(diseaseindex,DSI)、表型和基因表达量的变化。【结果】

SmWRKY30

开放阅读框为891bp,具有WRKY基因家族保守结构域。构建系统进化树发现,SmWRKY30与蒜芥茄和茄子SmWRKY65亲缘

关系近。抗病材料YS40和感病材料ZP80的cDNA序列存在6个SNP和1个Indel的差异,氨基酸翻译差异大,启动子区

域差异明显,YS40比ZP80少一个GT1-motif启动子元件。接种青枯菌后,分别对抗感病材料根、茎、叶组织的SmWRKY30

表达量进行分析,结果显示,接种青枯菌14d,在根中,YS40中SmWRKY30的表达量显著高于ZP80,而在茎中,SmWRKY30

的表达量无明显差异。接种青枯菌5和14d,在叶片中,YS40中SmWRKY30的表达量显著高于ZP80,表明SmWRKY30的高

表达可能与茄子抗青枯病有关。通过对抗病材料YS40进行SmWRKY30沉默,qRT-PCR结果表明,pTRV2::SmWRKY30沉默植

株中SmWRKY30的表达量显著低于清水和pTRV2::00空载处理植株,说明抗病材料YS40中SmWRKY30被成功沉默。表型观

察发现,接种青枯菌后,pTRV2::SmWRKY30沉默植株叶片明显发黄萎蔫,14d后DSI为2.07,表现易感青枯病。通过对

茄子与番茄同源的4个STH2基因进行定量分析,发现STH2基因表达量均呈先上升后下降的变化趋势。接菌1d后,抗

病材料中仅有STH2-3表达量显著高于感病材料。接菌5d后,抗病材料中STH2-3和STH2-4的表达量显著低于感病材料。

接菌7和14d后,抗、感病材料中4个STH2基因的表达量均无明显差异。且抗病材料中4个STH2基因的表达情况与SmWRKY30

的表达趋势均明显不同。【结论】SmWRKY30可能参与且正向调控茄子抗青枯病相关反应过程,但可能不是通过与STH2基

因作用使茄子对青枯病产生抗性。

关键词:茄子;青枯病;WRKY转录因子;病毒诱导的基因沉默;表达分析

EffectAnalysisofSmWRKY30inEggplantResi

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