3.2基因工程的基本操作程序(第1课时）高二生物课件（人教版2019选择性必修3）.pptxVIP

3.2基因工程的基本操作程序;苏云金杆菌通过产生苏云金杆菌伴胞晶体蛋白(Bt抗虫蛋白)，破坏鳞翅目昆虫的消化系统来杀死棉铃虫(P76);培育转基因抗虫棉的简要过程;基因工程的基本操作程序;一.目的基因的筛选与获取;用苏云金杆菌制成的生物杀虫剂广泛用于防治棉花虫害;;;②获取目的基因的方法;1.结合体内DNA复制过程，思考PCR的进行需要哪些条件？

2.总结出PCR的概念、原理、目的、优点。

3.构建出PCR的大致过程。

4.PCR扩增为什么需要引物？

5.如何对产物进行鉴定？

6.PCR技术与DNA复制过程比较？;【重温】DNA体内复制的过程及条件;PCR技术：;参与的组分;;②PCR过程;3’;第二轮循环的产物;思考:

获取目的基因时至少要经过几次循环才能分离出目的基因？

复性的过程此时会不会出现DNA解开的两条链结合的情况？如何避免？

PCR可以扩增mRNA吗?

;1、目标片段的DNA分子经PCR反应循环n次，DNA分子有个。DNA链有_____条

共需要消耗引物的数量为个。n代后，完整的目的基因有个

2、运用PCR技术扩增DNA分子时，需经过变性→复性→延伸→重复过程，经过4轮循环后，得到的子代DNA分子中，不同时含有两种引物的DNA分子占。

3、利用PCR技术可以扩增目的基因，PCR反应体系中除含缓冲液、模板DNA、dNTP、耐高温的DNA酶、引物等。其中引物应选用图中的（填图中标号）。;②PCR技术扩增过程小结;凝胶电泳原理与结果图;比较项目;(1)PCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应（）

(2)PCR扩增技术中，需用解旋酶使双链DNA解聚（）

(3)PCR过程使用的DNA聚合酶的特点是耐高温（）

(4)PCR技术中，DNA模板链上碱基G和C的比例越高，DNA变性解链的温度就越高（）

(5)PCR扩增过程中，需要添加ATP为新链合成提供能量（）

(6)PCR扩增过程中，通过温度变化的控制为变性、复性和延伸等过程提供能量（）;1.下图表示利用PCR技术扩增目的

基因的部分过程，其原理与细胞内

DNA复制类似。下列叙述错误的

是（）;2.(2021·湖北卷)某实验利用PCR技术获取目的基因，实验结果显示除目的基因条带(引物与模板完全配对)外，???有2条非特异条带(引物和模板不完全配对)。为了减少反应中非特异条带的产生，以下措施中有效的是()

A.增加模板DNA的量B.延长热变性的时间

C.延长延伸的时间D.提高复性的温度;3（2021·全国甲卷·高考真题）PCR技术可用于临床的病原菌检测。为检测病人是否感染了某种病原菌，医生进行了相关操作：

①分析PCR扩增结果；②从病人组织样本中提取DNA；

③利用PCR扩增DNA片段；④采集病人组织样本。回答下列问题：

（1）若要得到正确的检测结果，正确的操作顺序应该是（用数字序号表示）。

（2）操作③中使用的酶是____________________________。PCR反应中的每次循环可分为变性、复性、三步，其中复性的结果是。

（3）PCR（多聚酶链式反应）技术是指________________________________________________________________________________________________________________________________。该技术目前被广泛地应用于疾病诊断等方面。PCR过程每次循环分为3步，其中温度最低的一步是______________。;获得足量的目的基因后，能否直接将目的基因导入受体细胞呢？;确保基因在受体细胞中稳定存在，并且遗传给下一代；

使目的基因能够表达和发挥作用。;①目的基因：;;小组活动：请文字和箭头表示基因表达载体的构建过程？;使用一种限制酶进行切割Bt基因和pBI121质粒，共有几种连接情况？

请大家尝试用胶带模拟DNA连接酶进行操作。;二.基因表达载体的构建;选择两种不同的限制酶同时对目的基因和质粒切割;1.某目基因两侧的DNA序列所含的限制酶酶切位点如图所示,下列可作该目的基因最佳载体的是 ()