灭菌方法与生物指示剂.pptVIP

SGMharmony第1页，共40页，星期日，2025年，2月5日概要灭菌法和生物指示剂生物指示剂的形式无菌保证水平灭菌工艺验证常用灭菌方法制药工业常用的灭菌方法生物指示剂的使用孢子数测定第2页，共40页，星期日，2025年，2月5日灭菌法和生物指示剂灭菌法系指用适当的物理或化学手段将物品中活的微生物杀灭或除去，从而使物品残存活微生物的概率下降至预期的无菌保证水平的方法。生物指示剂系一类特殊的活微生物制品，可用于确认灭菌设备的性能、灭菌程序的验证、生产过程灭菌效果的监控等。用于灭菌验证中的生物指示剂一般是细菌的孢子。第3页，共40页，星期日，2025年，2月5日生物指示剂的形式一定数量的孢子附着在惰性载体上，如滤纸条、玻片、不锈钢、塑料制品等孢子悬浮液密封于安瓿中第4页，共40页，星期日，2025年，2月5日无菌保证水平无菌保证水平一批物品的无菌特性只能相对地通过物品中活微生物的概率低至某个可接受水平来表述，即SAL（sterilityassurancelevel）。我国及欧美药典都把SAL不得大于百万分之一作为最终灭菌产品无菌保证的要求，即SAL≤10－6第5页，共40页，星期日，2025年，2月5日灭菌工艺验证验证一个灭菌工艺系统能否使产品灭菌后达到无菌要求,通常认为灭菌后微生物残存概率小于1×10-6。物理性验证：通过得到的热分布与热穿透数据,来估测一个灭菌程序对微生物的致死性。化学指示剂验证：物品包外用化学指示剂用于验证物品是否经过灭菌处理，物品包内中心部位的化学指示剂才可作为物品是否达到灭菌的参考标志。生物指示剂验证：将已知其耐热性的生物指示剂直接接种在产品溶液或相似溶液中进行验证,是评判灭菌工艺杀灭效果最直观有效的方法,也是灭菌工艺验证必不可少的试验。第6页，共40页，星期日，2025年，2月5日常用的灭菌方法湿热灭菌法干热灭菌法气体灭菌法辐射灭菌法过滤除菌法第7页，共40页，星期日，2025年，2月5日不同灭菌方式不同的菌种种类的选择灭菌方法生物指示剂保藏号D值备注湿热灭菌法嗜热脂肪芽孢杆菌BacillusstearothermophilusNCTC10007NCIMB8157ATCC79531.5-3.0min生孢梭菌孢子ClostridiumsporogenesNCTC8594NCIMB8053ATCC79550.4-0.8min干热灭菌法枯草芽孢杆菌BacillussubtilisNCIMB8058ATCC93721.5min去热原验证时加大肠杆菌内毒素(Escherichiacoliendoxin)辐射灭菌法短小芽孢杆菌BacilluspumilusNCTC10327NCIMB10692ATCC271423kGy短小芽孢杆菌孢子可用于监控灭菌过程，但不能用于灭菌辐射剂量的建立气体灭菌法枯草芽孢杆菌BacillussubtilisNCTC10073ATCC93722.5min环氧乙烷灭菌嗜热脂肪芽孢杆菌BacillusstearothermophilusNCTC10007NCIMB8157ATCC795312980气态过氧化氢灭菌过滤除菌法缺陷假单胞菌PseudomonasdiminutaATCC19146用于滤膜孔径为0.22μm的滤器黏质沙雷菌Serratin?marcescensATCC14756用于滤膜孔径为0.45μm的滤器第8页，共40页，星期日，2025年，2月5日湿热灭菌法指将物品置于灭菌柜内利用高压饱和蒸汽、过热水喷淋等手段使微生物菌体中的蛋白质、核酸发生变性而杀灭微生物的方法。须保证物品灭菌后的SAL≤10-6对热稳定的物品，可采用过度杀灭法，其SAL应≤10-12第9页，共40页，星期日，2025年，2月5日适用范围药品、容器、培养基、无菌衣、胶塞以及其它遇高温和潮湿不发生变化或损坏的物品第10页，共40页，星期日，2025年，2月5日常用的生物指示剂嗜热脂肪芽孢杆菌孢子(SporesofBacillusstearothermophilus，NCTC10007、NCIMB8157、ATCC7953)D值为1.5～3.0min生孢梭菌孢子(SporesofClostridiumsporogenes，NCTC8594、NCIMB8053、ATCC7955