免疫学技术概论.pdfVIP

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第十一章免疫学技术概论

免疫学技术是指利用免疫反应的特异性原理.,建立各种检测与析技术,以及建

立这些技术的各种制备主意。

免疫学技术包括:

①免疫血清学技术:用于检测抗原或抗体的体外免疫反应技术,或称免疫检测技

②细胞免疫技术:用于析研究机体细胞免疫功能与状态的免疫学技术

③免疫制备技术:用于建立免疫检测主意的技术

第1节免疫血清学技术

抗原与相应抗体在体内和体外均能发生特异性结合反应,因抗体主要来自血清,

因此在体外举行的抗原抗体反应称为血清学反应或免疫血清学技术。

一、免疫血清学反应的基本原埋

抗原与抗体的特异性结合,主要是基于抗原与抗体子结构及立体构型的互补,

以及由多种因素造成的两者在子间引力参加下发生的可逆性免疫化学反应。

1.抗原抗体的结合力

①库仑引力/静电引力:是抗原与抗体带有相反电荷的氨基与叛基之间互相吸引

的力。其大小与两个电荷间距离的平方呈反比。

②范德华引力:是原子与原子、子与子互相临近时子极化作用产生的一种

吸引力,引力大小与子空间构象的互补性有关。

③氢键作用:是供氢体上的氢原子和受氢体原子间的引力。

④疏水作用:在水溶液中两个疏水基团互相接触,因为对水子的排斥而趋向聚

拢的力。疏水作使劲在抗原抗体结合力中作用最强。

2.抗原抗体的亲和力与亲合力

①亲和力(affinity):指抗体的抗原结合位点与相应的抗原决定簇之间的结合强度,

它是抗原抗体间固有的结合力。

亲和力可用平衡常数K表示:K=KI/K2(Ki为结合常数,K2为解离常数)

②亲合力(avidly):指一个抗体子与因冏抗原表位之间结合的强度,与抗体结

朽木易折,金石可镂。

合价直接相关。亲合力表现为多价优势。

3.抗原抗体的胶体特性及亲水性转化为疏水性

①胶体特性:抗体和大多数抗原同属蛋白质,在通常的反应条件下均带有负电荷,

使极化的水子在其周围形成水化层,成为亲水胶体。

②亲水性改变:抗原抗体结合使表面电荷减少,水化层变薄,失去亲水性能,抗

原抗体复:合物由亲水胶体转化为疏水胶体。在一定浓度电解质的作用下,可中和

胶体粒子表面的电荷,使各疏水胶体进一步靠拢,形成可见的抗原抗体复合物。

二、免疫血清学反应的普通特点

1.特异性与交错性

抗原与抗体的结合具有高度特异性,这是血清学实验用于析各种抗原和举行疾

病诊断的基础。但若两种天然抗原之间含有部相同抗原时则发生交错反应。普

通血缘越近,交错反应的程度也越高。除互相交错反应外,也有表现为单向交错

的。

交错反应是区别血清型和亚型的重要根,两个菌毒()株间交错反应程度通常以

相关系数R()表示:R=HUxioo%

(门二异源血清效价响源血清效价1,r2=异源血清效价2伺源血清效价2)

•通常以R值的大小判定型和亚型:R80%时为同一亚型,R在25%和80%之

间为同型的不同亚型,R25%时为不同的型。但这一标准视详细对象不同而异。

•在亚型鉴定时,不仅要注重R值,还应重视r1和r2的值,若门显著高于2「

时则为单向交错,应选用门的毒株作疫苗株,以扩大应用范围。

2.可逆性

抗原与抗体的结合仅是分子表面的结合,是弱能量的非共价结合,为可逆反应。

其结合力决定于抗体的抗原结合位点与抗原表位之间形成非共价键的数量、性质

和距离。

3.最适比例性

抗原抗体结合浮上可见反应具有一定的量比关系,惟独当两者比例合适时,才发

生最强的结合反应。

的帚等价带

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