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第46卷第2期中国预防兽医学报Vol.46,No.2
2024年2月ChineseJournalofPreventiveVeterinaryMedicineFeb.2024
doi:10.3969/j.issn.1008-0589.202305008
中国不同地区猪轮状病毒的分离鉴定及分子流行病学分析
燕贺12,孙玉洁12,赵文影12,谢莉敏12,黄柏成12,田克恭1,2*,张云静1,2*,逢文强1,2*
(1.国家兽用药品工程技术研究中心,河南洛阳471000;2.普莱柯生物工程股份有限公司,河南洛阳471000)
摘要:为鉴定国内不同地区猪轮状病毒(Porcinerotavirus,PRoV)并分析其分子流行病学特征,本研究将从
我国不同地区收集病料中检测到的16份PRoV阳性仔猪粪便样品和小肠内容物处理后接种MA-104细胞,传代后进
行荧光定量PCR(qPCR)和间接免疫荧光试验(IFA)鉴定,并经电镜观察。结果显示,其中7份样品F1~F3代病毒液
qPCRCt值均随着传代次数的升高而逐渐降低,IFA鉴定结果显示均能在细胞中观察到特异性荧光,电镜观察到直
径约70nm无囊膜的病毒粒子,表明本实验分离到7株PRoV。利用RT-PCR扩增7株分离株和其余9份PRoV的阳性
样品的VP7基因并测序分析基因型,基于VP7基因进行同源性和遗传进化分析。结果显示,16份阳性样品包含3种
G型,即G9(7/16)、G4(6/16)和G3(3/16),同时G9型FJ-2021分离株和G4型JS01-2021分离株与近两年流行株亲缘关
系较近。统计16份样品中G型PRoV的地域分布,结果显示华东地区有G9、G4和G3型的流行,四川有G3和G9型流
行,广东有G9型的流行,分别与华东地区、四川地区和广西地区报道的流行G型一致;除此之外,G9型在云南、
辽宁、湖南均有流行,G4基因型在广西、广东、陕西、黑龙江、河南均有流行。本研究首次收集了来自我国12
个省市的PRoV阳性临床样品并进行PRoV的分离鉴定,丰富了PRoV在国内的流行资料,对不同地区针对性的防
控PRoV的感染提供了流行病学数据,同时为进一步研究不同G型PRoV的致病机制和疫苗研发奠定了基础。
关键词:猪轮状病毒;分离;鉴定
中图分类号:S852.65文献标识码:A文章编号:1008-0589(2024)02-0201-05
Isolationandmolecularepidemiologicalanalysisofporcine
rotavirusinsomeregionsofChina
YANHe,SUNYu-jie2,HAOWen-ying,XIELi-min2,HUANGBai-cheng*,TIANKe-gong*,
ZHANGYun-jing,PANGWen-qiangl-*
(1.NationalResearchCenterforVeterinaryMedicine,Luoyang471000,China;2.PublikeBioengineeringCo.,Ltd.,Luoyang471000,China)
Abstract:ToisolateporcinerotavirustypeA,16fecalsamplesandsmallintestinecontentsofPRoVpositivepigletscollected
fromdifferentregionsweretreatedandinoculatedwithMA-104cells.Afterpassage,fluorescencequantitativePCR(qPCR),
indirectimmunofluorescenceassay(IFA),electronmicroscopyandsequenceanalysiswereusedforidentification.
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