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2020pcr考试试题及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR反应的基本步骤不包括（）

A.变性B.复性C.延伸D.转录

2.Taq酶的特点是（）

A.耐高温B.耐低温C.催化DNA合成D.A和C

3.PCR引物设计时，长度一般为（）

A.10-15bpB.15-30bpC.30-50bpD.50-100bp

4.下列哪种物质不是PCR反应必需的（）

A.dNTPB.Mg2?C.RNA聚合酶D.引物

5.PCR反应体系中，模板DNA的量一般为（）

A.1-10ngB.10-100ngC.100-1000ngD.1μg以上

6.退火温度一般比引物的Tm值低（）

A.1-2℃B.3-5℃C.5-10℃D.10-15℃

7.下列关于PCR技术叙述错误的是（）

A.可用于基因诊断B.可用于基因克隆C.只能扩增已知序列D.操作简单

8.PCR反应的特异性主要取决于（）

A.模板B.引物C.Taq酶D.dNTP

9.第一次PCR循环的变性时间一般为（）

A.30sB.1minC.2minD.5min

10.进行PCR实验时，防止污染的关键是（）

A.实验环境清洁B.试剂纯净C.操作规范D.以上都是

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR技术的应用领域包括（）

A.疾病诊断B.法医鉴定C.基因克隆D.分子进化研究

2.影响PCR反应的因素有（）

A.模板质量B.引物设计C.反应温度D.循环次数

3.好的PCR引物应具备的特点有（）

A.特异性强B.避免形成引物二聚体C.碱基分布均匀D.Tm值合适

4.PCR反应体系包含（）

A.模板DNAB.引物C.Taq酶D.dNTP

5.以下属于PCR衍生技术的有（）

A.RT-PCRB.qPCRC.巢式PCRD.多重PCR

6.进行PCR实验时，需要用到的仪器有（）

A.离心机B.移液器C.PCR仪D.凝胶成像系统

7.在PCR反应中，Mg2?的作用是（）

A.激活Taq酶B.稳定引物与模板结合C.参与DNA合成D.调节反应pH

8.PCR产物的分析方法有（）

A.琼脂糖凝胶电泳B.聚丙烯酰胺凝胶电泳C.测序D.酶切分析

9.关于PCR技术的优点，正确的是（）

A.灵敏度高B.特异性强C.快速高效D.可扩增未知序列

10.设计PCR引物时需要考虑的因素有（）

A.引物的长度B.引物的GC含量C.引物的Tm值D.引物的3端碱基

三、判断题（每题2分，共10题）

1.PCR技术可以扩增任意长度的DNA片段。（）

2.Taq酶具有3→5外切酶活性。（）

3.引物浓度过高会导致非特异性扩增。（）

4.PCR反应中，延伸时间越长越好。（）

5.只要模板DNA质量好，PCR反应就能成功。（）

6.复性温度越高，PCR反应的特异性越强。（）

7.荧光定量PCR可以对核酸进行绝对定量和相对定量。（）

8.巢式PCR能提高PCR反应的特异性和灵敏度。（）

9.进行PCR实验时，使用一次性吸头可以有效防止污染。（）

10.PCR产物的产量与模板量呈线性关系。（）

四、简答题（每题5分，共4题）

1.简述PCR反应的基本原理。

利用DNA半保留复制原理，通过高温变性使双链DNA解开成单链，低温退火让引物与模板单链结合，适温延伸在Taq酶作用下以dNTP为原料合成新的DNA链，经多次循环实现特定DNA片段扩增。

2.简述引物设计的基本原则。

特异性要强，避免与非目标序列结合；避免形成引物二聚体；碱基分布均匀，GC含量在40%-60%；长度15-30bp左右，Tm值在55-65℃。

3.列举至少两种PCR衍生技术及其应用。

RT-PCR用于反转录扩增RNA为cDNA，常用于基因表达分析；qPCR可对核酸定量，用于病原