基于iTRAQ技术分析早期糖尿病肾病肾阴虚证患者血浆蛋白质组学.pdfVIP

２０２４年２月１０日第２期中医学报第３９卷总第３０９期

Ｎｏ.２１０Ｆｅｂｒｕａｒｙ２０２４ＡＣＴＡＣＨＩＮＥＳＥＭＥＤＩＣＩＮＥＶｏｌ.３９Ｎｏ.３０９

临床研究

基于ｉＴＲＡＱ技术分析早期糖尿病肾病肾阴虚证

患者血浆蛋白质组学∗

１２２２２１３

耿宇轩ꎬ赵青ꎬ郭文涛ꎬ程吟ꎬ黄怡ꎬ冯龙ꎬ卢洪梅

１.河南中医药大学ꎬ河南郑州４５００４６ꎻ２.广东医科大学ꎬ广东东莞５２３８０８ꎻ３.广东医科大学附属

东莞第一医院ꎬ广东东莞５２３８０８

摘要:目的:筛选糖尿病肾病(ｄｉａｂｅｔｉｃｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙꎬＤＮ)肾阴虚证敏感的血浆分子标志物ꎬ探究糖尿病肾病肾阴虚证的生物学

基础及其发病机制ꎮ方法:收集２４例早期ＤＮ肾阴虚患者(ＤＮ阴虚证组)的血浆和２４例正常人群血浆(ＮＣ组)ꎬ应用同位素

标记的相对和绝对定量(ｉｓｏｂａｒｉｃｔａｇｆｏｒｒｅｌａｔｉｖｅａｎｄａｂｓｏｌｕｔｅｑｕａｎ－ｔｉｆｉｃａｔｉｏｎꎬｉＴＲＡＱ)标记的二维液相色谱串联质谱(ｔｗｏ－ｄｉ￣

ｍｅｎｓｉｏｎａｌｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ－ｔａｎｄｅｍｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙꎬ２ＤＬＣ－ＭＳ/ＭＳ)方法检测血浆蛋白质ꎬ利用基因本体论(ＧｅｎｅＯｎ￣

ｔｏｌｏｇｙꎬＧＯ)、京都基因与基因组百科全书(ＫｙｏｔｏＥｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａｏｆＧｅｎｅｓａｎｄＧｅｎｏｍｅｓꎬＫＥＧＧ)及蛋白质互作网络等方法筛选血浆

差异蛋白ꎬ采用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ对筛选出来的蛋白进行验证ꎮ结果:与ＮＣ组比较ꎬＤＮ阴虚证组中共鉴定出３７个差异蛋白质(差

异倍数２ꎬＰ０.０５)ꎬ包括２０个上调蛋白和１７个下调蛋白ꎮ这些蛋白主要涉及胆固醇代谢、补体及凝血级联反应、脂肪消化

吸收等与心血管疾病有明显关系的通路ꎮ进一步验证发现ＨＰ和ＦＧＧ蛋白表达高于ＮＣ组ꎬ载脂蛋白ＡＩ表达低于ＮＣ组

(Ｐ０.０５)ꎬＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ结果与ｉＴＲＡＱ质谱结果具有一致性ꎮ结论:ｉＴＲＡＱ结合２ＤＬＣ－ＭＳ/ＭＳ技术可以有效筛选出ＤＮ肾

阴虚证中差异的蛋白ꎬ本研究鉴定的３７种蛋白有可能为ＤＮ的早期诊断和中医证型研究提供潜在分子标志物ꎮ

关键词:糖尿病肾病ꎻ肾阴虚证ꎻ蛋白质组学ꎻｉＴＲＡＱ技术

ＤＯＩ:１０.１６３６８/ｊ.ｉｓｓｎ.１６７４－８９９９.２０２４.０２.０６６

中图分类号:Ｒ２５９.８７２文献标志码:Ａ文章编号:１６７４－８９９９(２０２４)０２－０４００－０６

ＡｎａｌｙｓｉｓｏｆＰｌａｓｍａＰｒｏｔｅｏｍｉｃｓｉｎＰａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈＫｉｄｎｅｙＹｉｎＤｅｆｉｃｉｅｎｃｙ

ＳｙｎｄｒｏｍｅｏｆＥａｒｌｙＤｉａｂｅｔｉｃＮｅｐｈｒｏｐａｔｈｙＢａｓｅｄｏｎｉＴＲＡＱＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ

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ＧＥＮＧＹｕｘｕａｎꎬＺＨＡＯＱｉｎｇꎬＧＵＯＷｅｎｔａｏꎬＣＨＥＮＧＹｉｎꎬＨＵＡＮＧＹｉꎬＦＥＮＧＬｏｎｇꎬＬＵＨｏｎｇｍｅｉ

１.ＨｅｎａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅꎬＺｈｅｎｇｚｈｏｕＨｅｎａｎＣｈｉｎａ４５００４６ꎻ２.ＧｕａｎｇｄｏｎｇＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＤｏｎｇｇｕａｎＧｕａｎｇｄｏｎｇ

Ｃｈｉｎａ５２３８０８ꎻ３.ＴｈｅＦｉｒｓｔＨｏｓｐ