第18讲 基因工程（课件）高考生物二轮复习（新高考通用）.pptxVIP

;;;;基因工程;;;;;限制酶;;;;;;;;;;

;【典例2】天然β淀粉酶耐热性差，不利于工业化应用。研究人员将某种天然β淀粉酶的第476位天冬氨酸替换为天冬酰胺后，其耐热性明显提升。下列叙述正确的是（????）

A．该工程属于蛋白质工程，其生产的蛋白质是自然界已有的蛋白质

B．该改造首先要预期蛋白质功能，再设计蛋白质结构，这是因为结构与功能相适应

C．该工程根据中心法则推断出的新的天然β淀粉酶的脱氧核苷酸序列是唯一的

D．该改造过程是在分子层次上进行的，要对天然β淀粉酶的氨基酸序列进行直接改造;题型1基因工程的基本工具

题型2基因工程的基本操作程序

题型3蛋白质工程的原理和应用

题型4PCR技术及其应用;（2024·贵州·高考真题）生物学实验中合理选择材料和研究方法是顺利完成实验的前提条件。下列叙述错误的是（???）

A．稀释涂布平板法既可分离菌株又可用于计数

B．进行胚胎分割时通常是在原肠胚期进行分割

C．获取马铃薯脱毒苗常选取茎尖进行组织培养

D．使用不同的限制酶也能产生相同的黏性末端;（2024·江西·高考真题）聚对苯二甲酸乙二醇酯（PET）是一种聚酯塑料，会造成环境污染。磷脂酶可催化PET降解。为获得高产磷脂酶的微生物，研究人员试验了2种方法。回答下列问题：

(1)方法1从土壤等环境样品中筛选高产磷脂酶的微生物。以磷脂酰乙醇酯（一种磷脂类物质）为唯一碳源制备培养基，可提高该方法的筛选效率。除碳源外，该培养基中至少还应该有、、等营养物质。

(2)方法2采用技术定向改造现有微生物，以获得高产磷脂酶的微生物。除了编码磷脂酶的基因外，该技术还需要、、

等“分子工具”。;(3)除了上述2种方法之外，还可以通过技术非定向改造现有微生物，筛选获得能够高产磷脂酶的微生物。

(4)将以上获得的微生物接种到鉴别培养基（在牛肉膏蛋白胨液体培养基中添加2%的琼脂粉和适量的卵黄磷脂）平板上培养，可以通过观察卵黄磷脂水解圈的大小，初步判断微生物产磷脂???的能力，但不能以水解圈大小作为判断微生物产磷脂酶能力的唯一依据。从平板制作的角度分析，其原因可能是。;;;;（2025·浙江·高考真题）3-磷酸甘油脱氢酶（GPD）是酵母细胞中甘油合成的关键酶。利用某假丝酵母菌株为材料，克隆具有高效催化效率的3-磷酸甘油脱氢酶的基因（Gpd）。采用的方案是：先通过第1次PCR扩增出该基因的中间部分，再通过第2次PCR分别扩增出该基因的两侧，经拼接获得完整基因的序列，如图所示，回答下列问题：;(1)分析不同物种的GPD蛋白序列，确

定蛋白质上相同的氨基酸区段，依据这

些氨基酸所对应的，

确定DNA序列，进而设计1对引物。

以该菌株基因组DNA为模板进行第1次

PCR，利用凝胶电泳分离并纯化DNA片段，进一步测定PCR产物的序列。在制备PCR反应体系时，每次用微量移液器吸取不同试剂前，需要确认或调整刻度和量程，还需要。;(2)若在上述PCR扩增结果中，除获得一

条阳性条带外，还出现了另外一条条带，

不可能的原因是__________。

A．DNA模板被其他酵母细胞的基因组

DNA污染

B．每个引物与DNA模板存在2个配对结合位点

C．在基因组中Gpd基因有2个拷贝

D．在基因组中存在1个与Gpd基因序列高度相似的其他基因;(3)为获得完整的Gpd基因，分别用限制

性核酸内切酶PstⅠ和SalⅠ单酶切基因

组DNA后，各自用DNA连接酶连接形成

环形DNA，再用苯酚-氯仿抽提除去杂质，

最后加入沉淀环形DNA。

根据第一次PCR产物测定获得的序列，重新设计一对引物，以环形DNA为模板进行第二次PCR，最后进行测序。用于第二次PCR的一对引物，其序列应是DNA链

上（A．P1和P2??B．P3和P4C．P1和P4D．P2和P3）。根据测序结果拼接获得完整的Gpd基因序列，其中的启动子和终止子具有