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流式细胞仪的应用

姓名：学号：2002015002

单位：研究生二队专业：病理学与病理生理学

对于一个毕业以后就从来没有进过实验室使用过各种尖端仪器的研究生来说，仪器分析这个课程对我来说显而易见是重要而又陌生的，就像一个小孩到了游乐园一样，每一种仪器都很吸引我，好奇心也驱使我特别想尽快操作一下这些仪器，唯一的遗憾是本课程课时太少，不能把中心实验室的所有仪器都了解一遍。12月4号学习了流式细胞仪的原理与基本应用方法，虽然没有操作过，但是我想对我在本次课上的所学的内容做一下总结并谈谈对流式细胞仪的粗浅认识，由于没有实际基础，不对的地方请老师多多谅解并纠正。

流式细胞仪（Flowcytometry）是对细胞进行分选和快速测的仪器。它可以将分散在液体中的各个细胞的物理性质，生物化学特征等参数进行快速测量并根据所得参数范围对目的细胞进行分选并存贮。这些参数可以包括每一个细胞的体积、细胞凋亡及所包含的可标记的蛋白质或者核酸的快速定量等。与传统的细胞测量方法（免疫荧光和免疫印迹）相比，其优缺点可总结如下表：

流式细胞仪

免疫荧光

免疫印迹

优点

明确阳性细胞比例

同时检测多种蛋白表达

蛋白定量容易

速度快，灵敏度高

阳性细胞的相对数量

明确组织和细胞内定为

检测整体表达情况

蛋白定量较容易

缺点

不能在组织和细胞内定位

蛋白定量困难

仅检测局部表达情况

1、不能组织或细胞内定位

2、不能确定阳性细胞比例

由上表可以看出，与传统的细胞检测方法相比，流式细胞仪具有无可比拟的技术优势和应用前景，甚至可以说流失细胞术完全能够推动医学科研的发展，是一个伟大的发明。

流式细胞仪的原理：将待测的细胞样品制作成单个细胞的混悬液，根据实验目的对需要检测和分选的细胞进行特异性荧光染色并放入样品管，在清洁气体的压力下进入流动室。流动室内含有鞘液，鞘液可以约束样品使之处在喷嘴中心以提高测量精度，并防止样品靠近喷孔壁以导致堵塞。在这种作用下细胞排成单列一个一个地在鞘液包裹下被喷嘴喷出形成液体流柱。流柱流经高度聚焦的激光束时被特异染色的细胞被激发而产生特异性荧光，荧光被检测系统检测并转变成电信号进入计算机分析系统而得到细胞的物理、生物特性。流式细胞仪的分选功能是由细胞分选器来完成的：由喷嘴射出的液柱被分割成一连串的小水滴，根据选定的某个参数由逻辑电路判明是否将被分选，而后由充电电路对选定细胞液滴充电，带电液滴携带细胞通过静电场而发生偏转，落入收集器中；其它液体被当作废液抽吸掉。

通过原理我们也可以很容易的得到流式细胞仪的基本结构和功能：

1、液流系统。流动室由样品管、鞘液管和喷嘴等组成，常用光学玻璃、石英等透明、稳定的材料制作。设计和制作均很精细，是液流系统的心脏。样品管贮放样品，单个细胞悬液在液流压力作用下从样品管射出；鞘液由鞘液管从四周流向喷孔，包围在样品外周后从喷嘴射出。为了保证液流是稳液，一般限制液流速度υ10m/s。由于鞘液的作用，被检测细胞被限制在液流的轴线上。流动室上装有压电晶体，受到振荡信号可发生振动。

流式细胞术的发明、改进，流式细胞仪的研制、改进的每一步都凝聚了人类必威体育精装版的科技和智慧，凝聚了生物学、光学、流体力学、临床医学、分子生物学、计算机科学等众多科技领域的先进技术。我相信，在结合了单克隆抗体技术、定量细胞化学，定量荧光细胞化学后，流式细胞术必然在生物学、临床医学、药物学等众多领域发挥更加积极的作用，也必然能够推动人类健康事业的长远发展，为造福人类健康做出无可替代的重要贡献。